植物检疫
植物檢疫
식물검역
PLANT QUARANTINE
2008年
5期
271-274
,共4页
邱德义%杨雷亮%岳巧云%管维%王章根%陈定虎
邱德義%楊雷亮%嶽巧雲%管維%王章根%陳定虎
구덕의%양뢰량%악교운%관유%왕장근%진정호
李痘病毒%外壳蛋白%原核表达%抗血清
李痘病毒%外殼蛋白%原覈錶達%抗血清
리두병독%외각단백%원핵표체%항혈청
用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上,得到pET29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性.
用RT-PCR的方法剋隆李痘病毒的外殼蛋白(CP)基因,然後將其連接到原覈錶達載體pET29(a)上,得到pET29a-PPV重組載體,將該載體轉化大腸桿菌BL21(DE3)後,IPTG誘導錶達產物經過SDS-PAGE分析,結果錶明PPV CP基因在大腸桿菌中得到瞭高效錶達.分彆用親和柱法和切膠法迴收特異性錶達蛋白,再免疫傢兔,穫得PPV特異性抗血清,經過酶聯免疫吸附法測定其效價分彆為3.2×104和4×103,且具有較高的特異性.
용RT-PCR적방법극륭리두병독적외각단백(CP)기인,연후장기련접도원핵표체재체pET29(a)상,득도pET29a-PPV중조재체,장해재체전화대장간균BL21(DE3)후,IPTG유도표체산물경과SDS-PAGE분석,결과표명PPV CP기인재대장간균중득도료고효표체.분별용친화주법화절효법회수특이성표체단백,재면역가토,획득PPV특이성항혈청,경과매련면역흡부법측정기효개분별위3.2×104화4×103,차구유교고적특이성.
