中国康复理论与实践
中國康複理論與實踐
중국강복이론여실천
CHINESE JOURNAL OF REHABILITATION THEORY & PRACTICE
2009年
4期
327-329,封3
,共4页
王金光%荆鑫%张建民%张明健%傅晨
王金光%荊鑫%張建民%張明健%傅晨
왕금광%형흠%장건민%장명건%부신
RNA干扰%抑制效应%Caspase-3
RNA榦擾%抑製效應%Caspase-3
RNA간우%억제효응%Caspase-3
目的 观察RNA干扰(RNAi) 效应对Caspase-3基因表达的抑制作用.方法 根据Caspase-3 基因序列及其二级结构特征,设计3条含21个碱基的小分子干扰RNA片段(siRNA)(Si-Caspase-3-1、Si-Caspase-3-2和Si-Caspase-3-3),确定并合成针对Caspase-3基因的siRNAs;利用脂质体介导方法将合成的siRNAs 转染神经胶质细胞,以未转染的细胞为对照.细胞爬片后,用荧光Hoechst33258染色,TUNEL法观察凋亡细胞.应用半定量RT-PCR 法和Western免疫印迹法检测Caspase-3蛋白酶活性.结果 合成的siRNAs可以抑制Caspase-3基因的表达,Si-Caspase-3-3在星形胶质细胞内对Caspase-3 mRNA表达的抑制效率为86.32%.结论 在细胞水平上,合成的siRNAs可以抑制Caspase-3基因的表达.
目的 觀察RNA榦擾(RNAi) 效應對Caspase-3基因錶達的抑製作用.方法 根據Caspase-3 基因序列及其二級結構特徵,設計3條含21箇堿基的小分子榦擾RNA片段(siRNA)(Si-Caspase-3-1、Si-Caspase-3-2和Si-Caspase-3-3),確定併閤成針對Caspase-3基因的siRNAs;利用脂質體介導方法將閤成的siRNAs 轉染神經膠質細胞,以未轉染的細胞為對照.細胞爬片後,用熒光Hoechst33258染色,TUNEL法觀察凋亡細胞.應用半定量RT-PCR 法和Western免疫印跡法檢測Caspase-3蛋白酶活性.結果 閤成的siRNAs可以抑製Caspase-3基因的錶達,Si-Caspase-3-3在星形膠質細胞內對Caspase-3 mRNA錶達的抑製效率為86.32%.結論 在細胞水平上,閤成的siRNAs可以抑製Caspase-3基因的錶達.
목적 관찰RNA간우(RNAi) 효응대Caspase-3기인표체적억제작용.방법 근거Caspase-3 기인서렬급기이급결구특정,설계3조함21개감기적소분자간우RNA편단(siRNA)(Si-Caspase-3-1、Si-Caspase-3-2화Si-Caspase-3-3),학정병합성침대Caspase-3기인적siRNAs;이용지질체개도방법장합성적siRNAs 전염신경효질세포,이미전염적세포위대조.세포파편후,용형광Hoechst33258염색,TUNEL법관찰조망세포.응용반정량RT-PCR 법화Western면역인적법검측Caspase-3단백매활성.결과 합성적siRNAs가이억제Caspase-3기인적표체,Si-Caspase-3-3재성형효질세포내대Caspase-3 mRNA표체적억제효솔위86.32%.결론 재세포수평상,합성적siRNAs가이억제Caspase-3기인적표체.