南通大学学报(医学版)
南通大學學報(醫學版)
남통대학학보(의학판)
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
2期
83-85
,共3页
阮坚丽%高源%管文贤%乔志明%钱伟峰
阮堅麗%高源%管文賢%喬誌明%錢偉峰
원견려%고원%관문현%교지명%전위봉
信号转录激活子3%RNA干扰%慢病毒
信號轉錄激活子3%RNA榦擾%慢病毒
신호전록격활자3%RNA간우%만병독
目的:构建人信号转录激活子3(STAT3)基因shRNA慢病毒载体.方法:从GenBank STAT3 mRNA上寻找到3条有效靶序列.合成3对针对靶序列的siRNA oligo,通过筛选获得最佳靶序列后合成相应的shRNA模板,将合成好的两条互补的DNA单链退火形成双链DNA,经与BamH I和Xho I酶切的pRNAT-U6.2/Lenti载体连接后产生shRNA慢病毒载体,酶切和测序鉴定.结果:酶切和测序鉴证实合成STAT3shRNA慢病毒载体寡核甘酸链插入正确.结论:成功构建人STAT3基因shRNA慢病毒载体.
目的:構建人信號轉錄激活子3(STAT3)基因shRNA慢病毒載體.方法:從GenBank STAT3 mRNA上尋找到3條有效靶序列.閤成3對針對靶序列的siRNA oligo,通過篩選穫得最佳靶序列後閤成相應的shRNA模闆,將閤成好的兩條互補的DNA單鏈退火形成雙鏈DNA,經與BamH I和Xho I酶切的pRNAT-U6.2/Lenti載體連接後產生shRNA慢病毒載體,酶切和測序鑒定.結果:酶切和測序鑒證實閤成STAT3shRNA慢病毒載體寡覈甘痠鏈插入正確.結論:成功構建人STAT3基因shRNA慢病毒載體.
목적:구건인신호전록격활자3(STAT3)기인shRNA만병독재체.방법:종GenBank STAT3 mRNA상심조도3조유효파서렬.합성3대침대파서렬적siRNA oligo,통과사선획득최가파서렬후합성상응적shRNA모판,장합성호적량조호보적DNA단련퇴화형성쌍련DNA,경여BamH I화Xho I매절적pRNAT-U6.2/Lenti재체련접후산생shRNA만병독재체,매절화측서감정.결과:매절화측서감증실합성STAT3shRNA만병독재체과핵감산련삽입정학.결론:성공구건인STAT3기인shRNA만병독재체.
