分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2010年
8期
1206-1210
,共5页
南铁贵%何素平%谭桂玉%李刚%王保民%黄璐琦
南鐵貴%何素平%譚桂玉%李剛%王保民%黃璐琦
남철귀%하소평%담계옥%리강%왕보민%황로기
马兜铃酸A%单克隆抗体%中药%酶联免疫分析法
馬兜鈴痠A%單剋隆抗體%中藥%酶聯免疫分析法
마두령산A%단극륭항체%중약%매련면역분석법
采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA.利用马兜铃酸A-BSA免疫Bal b/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与其结构类似物马兜铃酸B、C和D的交叉反应率分别为2.8%,3.5%和31.2%.基于抗马兜铃酸A单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为1.9 μg/L,检测范围为0.5～7.5 μg/L.icELISA添加回收率为86%～97%,相对标准偏差在5.2%～11.1%之间.利用所建立的icELISA测定了6个中药材和5个中成药中马兜铃酸A的含量,并用高效液相色谱法(HPLC)进行了验证,其中关木通、广防己、天仙藤、马兜铃和青木香中均检测出马兜铃酸A,而川木通和5个中成药中未检测到马兜铃酸A.结果表明: 本方法可用于中药中马兜铃酸A的快速检测.
採用活化酯法,將馬兜鈴痠A分彆與牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯,得到免疫抗原馬兜鈴痠A-BSA和包被抗原馬兜鈴痠A-OVA.利用馬兜鈴痠A-BSA免疫Bal b/c小鼠,製得鼠單剋隆抗體1A11,單抗效價為2×104;單抗為IgG1類,輕鏈為κ型;與其結構類似物馬兜鈴痠B、C和D的交扠反應率分彆為2.8%,3.5%和31.2%.基于抗馬兜鈴痠A單剋隆抗體的間接競爭酶聯免疫分析方法(icELISA)的IC50為1.9 μg/L,檢測範圍為0.5～7.5 μg/L.icELISA添加迴收率為86%～97%,相對標準偏差在5.2%～11.1%之間.利用所建立的icELISA測定瞭6箇中藥材和5箇中成藥中馬兜鈴痠A的含量,併用高效液相色譜法(HPLC)進行瞭驗證,其中關木通、廣防己、天仙籐、馬兜鈴和青木香中均檢測齣馬兜鈴痠A,而川木通和5箇中成藥中未檢測到馬兜鈴痠A.結果錶明: 本方法可用于中藥中馬兜鈴痠A的快速檢測.
채용활화지법,장마두령산A분별여우혈청단백(BSA)화란청단백(OVA)우련,득도면역항원마두령산A-BSA화포피항원마두령산A-OVA.이용마두령산A-BSA면역Bal b/c소서,제득서단극륭항체1A11,단항효개위2×104;단항위IgG1류,경련위κ형;여기결구유사물마두령산B、C화D적교차반응솔분별위2.8%,3.5%화31.2%.기우항마두령산A단극륭항체적간접경쟁매련면역분석방법(icELISA)적IC50위1.9 μg/L,검측범위위0.5～7.5 μg/L.icELISA첨가회수솔위86%～97%,상대표준편차재5.2%～11.1%지간.이용소건립적icELISA측정료6개중약재화5개중성약중마두령산A적함량,병용고효액상색보법(HPLC)진행료험증,기중관목통、엄방기、천선등、마두령화청목향중균검측출마두령산A,이천목통화5개중성약중미검측도마두령산A.결과표명: 본방법가용우중약중마두령산A적쾌속검측.
