四川动物
四川動物
사천동물
SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY
2011年
6期
886-889
,共4页
孙凯%刘亚刚%王妍%王盼盼%胡炳峰%王文伯
孫凱%劉亞剛%王妍%王盼盼%鬍炳峰%王文伯
손개%류아강%왕연%왕반반%호병봉%왕문백
牦牛%E2基因%牛病毒性腹泻病毒%原核表达
牦牛%E2基因%牛病毒性腹瀉病毒%原覈錶達
모우%E2기인%우병독성복사병독%원핵표체
运用聚合酶链式反应,以牦牛BVDV基因组DNA为模板扩增出牦牛BVDV E2基因.为研究E2蛋白的抗原性,将E2基因插入到pET-32a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-E2,并转化至BL21(DE3)宿主菌中,利用IPTG诱导表达.经SDS-PAGE检测,pET-32a-E2在宿主菌BL21(DE3)中表达出约58 kD的融合蛋白,结果表明E2基因在BL21(DE3)宿主菌获得了高效表达,表达蛋白大小与预期相符.Western-blotting结果显示E2蛋白具有良好抗原性.这对以后研究E2蛋白功能等具有十分重要的意义.
運用聚閤酶鏈式反應,以牦牛BVDV基因組DNA為模闆擴增齣牦牛BVDV E2基因.為研究E2蛋白的抗原性,將E2基因插入到pET-32a原覈錶達載體,構建重組錶達質粒pET-32a-E2,併轉化至BL21(DE3)宿主菌中,利用IPTG誘導錶達.經SDS-PAGE檢測,pET-32a-E2在宿主菌BL21(DE3)中錶達齣約58 kD的融閤蛋白,結果錶明E2基因在BL21(DE3)宿主菌穫得瞭高效錶達,錶達蛋白大小與預期相符.Western-blotting結果顯示E2蛋白具有良好抗原性.這對以後研究E2蛋白功能等具有十分重要的意義.
운용취합매련식반응,이모우BVDV기인조DNA위모판확증출모우BVDV E2기인.위연구E2단백적항원성,장E2기인삽입도pET-32a원핵표체재체,구건중조표체질립pET-32a-E2,병전화지BL21(DE3)숙주균중,이용IPTG유도표체.경SDS-PAGE검측,pET-32a-E2재숙주균BL21(DE3)중표체출약58 kD적융합단백,결과표명E2기인재BL21(DE3)숙주균획득료고효표체,표체단백대소여예기상부.Western-blotting결과현시E2단백구유량호항원성.저대이후연구E2단백공능등구유십분중요적의의.
