中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
10期
1875-1878
,共4页
仇飞%张辉%赵旭杰%朱雪花%王侃侃%张济
仇飛%張輝%趙旭傑%硃雪花%王侃侃%張濟
구비%장휘%조욱걸%주설화%왕간간%장제
免疫荧光%实时定量RT-PCR%PML-%RARα%急性早幼粒细胞白血病%NB4%细胞%U937%细胞
免疫熒光%實時定量RT-PCR%PML-%RARα%急性早幼粒細胞白血病%NB4%細胞%U937%細胞
면역형광%실시정량RT-PCR%PML-%RARα%급성조유립세포백혈병%NB4%세포%U937%세포
背景:实时定量RT-PCR 只能间接地反映融合基因表达量的变化,并不能在细胞原位直观反映急性早幼粒细胞白血病患者细胞内PML-RARα融合蛋白在全反式维甲酸治疗前后的相对表达量.目的:探讨免疫荧光技术检测融合蛋白PML-RARα表达的动态变化在判断急性早幼粒细胞白血病的全反式维甲酸早期治疗的效果.方法:应用免疫荧光技术检测全反式维甲酸干预的急性早幼粒细胞白血病经典细胞株NB4 细胞或来源于急性早幼粒细胞白血病患者的NB4 细胞PML-RARα蛋白的表达,以实时定量RT-PCR 检测细胞PML-RARα mRNA 的表达作为对照,以评价免疫荧光技术的可靠性.结果与结论:免疫荧光染色显示,无论是体外培养的NB4 细胞,还是患者骨髓内的NB4 细胞,在全反式维甲酸干预前细胞内均可见大量红色的融合蛋白PML-RARα,大小不均一、形状不规则,全反式维甲酸干预后,NB4 细胞内红色的融合蛋白PML- RARα形状逐渐规则,弥散状态变为散在分布,且随着全反式维甲酸干预时间的延长,原有的弥散状态逐渐消失.实时定量RT-PCR 测得的PML-RARα mRNA 的变化趋势与免疫荧光相一致.说明免疫荧光技术检测PML-RARα能够更为直观地判断全反式维甲酸的治疗效果.
揹景:實時定量RT-PCR 隻能間接地反映融閤基因錶達量的變化,併不能在細胞原位直觀反映急性早幼粒細胞白血病患者細胞內PML-RARα融閤蛋白在全反式維甲痠治療前後的相對錶達量.目的:探討免疫熒光技術檢測融閤蛋白PML-RARα錶達的動態變化在判斷急性早幼粒細胞白血病的全反式維甲痠早期治療的效果.方法:應用免疫熒光技術檢測全反式維甲痠榦預的急性早幼粒細胞白血病經典細胞株NB4 細胞或來源于急性早幼粒細胞白血病患者的NB4 細胞PML-RARα蛋白的錶達,以實時定量RT-PCR 檢測細胞PML-RARα mRNA 的錶達作為對照,以評價免疫熒光技術的可靠性.結果與結論:免疫熒光染色顯示,無論是體外培養的NB4 細胞,還是患者骨髓內的NB4 細胞,在全反式維甲痠榦預前細胞內均可見大量紅色的融閤蛋白PML-RARα,大小不均一、形狀不規則,全反式維甲痠榦預後,NB4 細胞內紅色的融閤蛋白PML- RARα形狀逐漸規則,瀰散狀態變為散在分佈,且隨著全反式維甲痠榦預時間的延長,原有的瀰散狀態逐漸消失.實時定量RT-PCR 測得的PML-RARα mRNA 的變化趨勢與免疫熒光相一緻.說明免疫熒光技術檢測PML-RARα能夠更為直觀地判斷全反式維甲痠的治療效果.
배경:실시정량RT-PCR 지능간접지반영융합기인표체량적변화,병불능재세포원위직관반영급성조유립세포백혈병환자세포내PML-RARα융합단백재전반식유갑산치료전후적상대표체량.목적:탐토면역형광기술검측융합단백PML-RARα표체적동태변화재판단급성조유립세포백혈병적전반식유갑산조기치료적효과.방법:응용면역형광기술검측전반식유갑산간예적급성조유립세포백혈병경전세포주NB4 세포혹래원우급성조유립세포백혈병환자적NB4 세포PML-RARα단백적표체,이실시정량RT-PCR 검측세포PML-RARα mRNA 적표체작위대조,이평개면역형광기술적가고성.결과여결론:면역형광염색현시,무론시체외배양적NB4 세포,환시환자골수내적NB4 세포,재전반식유갑산간예전세포내균가견대량홍색적융합단백PML-RARα,대소불균일、형상불규칙,전반식유갑산간예후,NB4 세포내홍색적융합단백PML- RARα형상축점규칙,미산상태변위산재분포,차수착전반식유갑산간예시간적연장,원유적미산상태축점소실.실시정량RT-PCR 측득적PML-RARα mRNA 적변화추세여면역형광상일치.설명면역형광기술검측PML-RARα능구경위직관지판단전반식유갑산적치료효과.
