中华妇产科杂志
中華婦產科雜誌
중화부산과잡지
CHINESE JOUNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2006年
6期
408-412
,共5页
李敏%黄在菊%董卫红%李晓艳%王晓翊%贺晓红%王瀚%王泽华
李敏%黃在菊%董衛紅%李曉豔%王曉翊%賀曉紅%王瀚%王澤華
리민%황재국%동위홍%리효염%왕효익%하효홍%왕한%왕택화
卵巢肿瘤%蛋白质p16%基因,p16%DNA甲基化%脱氧胞苷
卵巢腫瘤%蛋白質p16%基因,p16%DNA甲基化%脫氧胞苷
란소종류%단백질p16%기인,p16%DNA갑기화%탈양포감
目的研究抑癌基因p16INK4A在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织及细胞系中的表达变化,分析其表达变化与甲基化的关系.方法选取7种卵巢癌细胞系、18份卵巢癌组织和10份正常卵巢组织为研究对象.采用甲基化特异性PCR方法检测p16INK4A基因甲基化状态;RT-PCR技术检测p16INK4A基因的mRNA表达;蛋白印迹(western blot)法检测P16INK4A蛋白的表达.5-杂氮-2'-脱氧胞苷对p16INK4A基因甲基化的卵巢癌细胞进行去甲基化处理,再次进行p16INK4A基因的mRNA和蛋白表达的检测,以及p16INK4A基因甲基化的分析.检测5-杂氮-2'-脱氧胞苷处理前后卵巢癌细胞的生长情况;并将处理前后的细胞接种于裸鼠,观测肿瘤的体积、重量.结果3种卵巢癌细胞系(Anglne、SW626和OVCAR3细胞)、6份卵巢癌组织中存在p16INK4A基因甲基化,卵巢癌细胞和卵巢癌组织中的甲基化率分别为3/7和33％(6/18).卵巢癌细胞系、卵巢癌组织和正常卵巢组织中,p16INK4A基因的mRNA相对含量的平均值分别为0.34±0.11、0.81±0.13、1.52±0.12,蛋白相对含量的平均值分别为0.56±0.14、1.32±0.12、2.09±0.11,卵巢癌细胞系、卵巢癌组织分别与正常卵巢组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).有甲基化表现的卵巢癌细胞和组织中p16INK4A基因的mRNA和蛋白表达均下降.5-杂氮-2'-脱氧胞苷处理能使p16INK4A基因甲基化的卵巢癌细胞中的p16INK4A基因的mRNA和蛋白重新表达或表达增高.与去甲基化处理前比较,去甲基化处理后Anglne、SW626和OVCAR3细胞的生长速度均减慢;接种去甲基化处理的OVCAR3细胞的裸鼠中,肿瘤体积和重量明显减小,分别为(0.243±0.022)cm3、(0.035±0.004)g.结论p16INK4A基因的表达下降或缺失在卵巢癌的发生中起重要作用,DNA甲基化是其表达缺陷的原因,去甲基化处理可以恢复p16INK4A基因的表达并抑制卵巢癌细胞的增殖.
目的研究抑癌基因p16INK4A在卵巢上皮性癌(卵巢癌)組織及細胞繫中的錶達變化,分析其錶達變化與甲基化的關繫.方法選取7種卵巢癌細胞繫、18份卵巢癌組織和10份正常卵巢組織為研究對象.採用甲基化特異性PCR方法檢測p16INK4A基因甲基化狀態;RT-PCR技術檢測p16INK4A基因的mRNA錶達;蛋白印跡(western blot)法檢測P16INK4A蛋白的錶達.5-雜氮-2'-脫氧胞苷對p16INK4A基因甲基化的卵巢癌細胞進行去甲基化處理,再次進行p16INK4A基因的mRNA和蛋白錶達的檢測,以及p16INK4A基因甲基化的分析.檢測5-雜氮-2'-脫氧胞苷處理前後卵巢癌細胞的生長情況;併將處理前後的細胞接種于裸鼠,觀測腫瘤的體積、重量.結果3種卵巢癌細胞繫(Anglne、SW626和OVCAR3細胞)、6份卵巢癌組織中存在p16INK4A基因甲基化,卵巢癌細胞和卵巢癌組織中的甲基化率分彆為3/7和33％(6/18).卵巢癌細胞繫、卵巢癌組織和正常卵巢組織中,p16INK4A基因的mRNA相對含量的平均值分彆為0.34±0.11、0.81±0.13、1.52±0.12,蛋白相對含量的平均值分彆為0.56±0.14、1.32±0.12、2.09±0.11,卵巢癌細胞繫、卵巢癌組織分彆與正常卵巢組織相比,差異均有統計學意義(P＜0.05).有甲基化錶現的卵巢癌細胞和組織中p16INK4A基因的mRNA和蛋白錶達均下降.5-雜氮-2'-脫氧胞苷處理能使p16INK4A基因甲基化的卵巢癌細胞中的p16INK4A基因的mRNA和蛋白重新錶達或錶達增高.與去甲基化處理前比較,去甲基化處理後Anglne、SW626和OVCAR3細胞的生長速度均減慢;接種去甲基化處理的OVCAR3細胞的裸鼠中,腫瘤體積和重量明顯減小,分彆為(0.243±0.022)cm3、(0.035±0.004)g.結論p16INK4A基因的錶達下降或缺失在卵巢癌的髮生中起重要作用,DNA甲基化是其錶達缺陷的原因,去甲基化處理可以恢複p16INK4A基因的錶達併抑製卵巢癌細胞的增殖.
목적연구억암기인p16INK4A재란소상피성암(란소암)조직급세포계중적표체변화,분석기표체변화여갑기화적관계.방법선취7충란소암세포계、18빈란소암조직화10빈정상란소조직위연구대상.채용갑기화특이성PCR방법검측p16INK4A기인갑기화상태;RT-PCR기술검측p16INK4A기인적mRNA표체;단백인적(western blot)법검측P16INK4A단백적표체.5-잡담-2'-탈양포감대p16INK4A기인갑기화적란소암세포진행거갑기화처리,재차진행p16INK4A기인적mRNA화단백표체적검측,이급p16INK4A기인갑기화적분석.검측5-잡담-2'-탈양포감처리전후란소암세포적생장정황;병장처리전후적세포접충우라서,관측종류적체적、중량.결과3충란소암세포계(Anglne、SW626화OVCAR3세포)、6빈란소암조직중존재p16INK4A기인갑기화,란소암세포화란소암조직중적갑기화솔분별위3/7화33％(6/18).란소암세포계、란소암조직화정상란소조직중,p16INK4A기인적mRNA상대함량적평균치분별위0.34±0.11、0.81±0.13、1.52±0.12,단백상대함량적평균치분별위0.56±0.14、1.32±0.12、2.09±0.11,란소암세포계、란소암조직분별여정상란소조직상비,차이균유통계학의의(P＜0.05).유갑기화표현적란소암세포화조직중p16INK4A기인적mRNA화단백표체균하강.5-잡담-2'-탈양포감처리능사p16INK4A기인갑기화적란소암세포중적p16INK4A기인적mRNA화단백중신표체혹표체증고.여거갑기화처리전비교,거갑기화처리후Anglne、SW626화OVCAR3세포적생장속도균감만;접충거갑기화처리적OVCAR3세포적라서중,종류체적화중량명현감소,분별위(0.243±0.022)cm3、(0.035±0.004)g.결론p16INK4A기인적표체하강혹결실재란소암적발생중기중요작용,DNA갑기화시기표체결함적원인,거갑기화처리가이회복p16INK4A기인적표체병억제란소암세포적증식.
