畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
9期
1422-1428
,共7页
杨春华%周延%孙思扬%钟毅%王川庆
楊春華%週延%孫思颺%鐘毅%王川慶
양춘화%주연%손사양%종의%왕천경
猪细环病毒%变性高效液相色谱%实时荧光PCR%PCR
豬細環病毒%變性高效液相色譜%實時熒光PCR%PCR
저세배병독%변성고효액상색보%실시형광PCR%PCR
为了应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪细环病毒1型和2型,根据猪细环病毒的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测.选择猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应.该检测方法具有较好的特异性和重复性;用质粒标准品进行TTSuV1和TTSuV2的PCR-DHPLC检测,灵敏度可达1.0×101拷贝·μL-1.对80份血清样本分别应用实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法及本文所建立的PCR-DHPLC法与进行检测,发现TTSuV1有63份PCR-DHPLC阳性,63份实时荧光PCR阳性,54份PCR凝胶电泳阳性;TTSuV2有69份PCR-DHPLC阳性,69份实时荧光PCR阳性,56份PCR-凝胶电泳阳性.本试验建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查.
為瞭應用PCR結閤變性高效液相色譜(DHPLC)技術檢測豬細環病毒1型和2型,根據豬細環病毒的序列特點設計特異性引物,PCR擴增產物經DHPLC技術進行快速檢測.選擇豬細小病毒、豬圓環病毒Ⅱ型和豬偽狂犬病毒進行特異性試驗,無交扠反應.該檢測方法具有較好的特異性和重複性;用質粒標準品進行TTSuV1和TTSuV2的PCR-DHPLC檢測,靈敏度可達1.0×101拷貝·μL-1.對80份血清樣本分彆應用實時熒光PCR法、PCR-凝膠電泳法及本文所建立的PCR-DHPLC法與進行檢測,髮現TTSuV1有63份PCR-DHPLC暘性,63份實時熒光PCR暘性,54份PCR凝膠電泳暘性;TTSuV2有69份PCR-DHPLC暘性,69份實時熒光PCR暘性,56份PCR-凝膠電泳暘性.本試驗建立的PCR-DHPLC法具有特異、敏感、快速、重複性好等優點,可用于TTSuV感染的分子流行病學調查.
위료응용PCR결합변성고효액상색보(DHPLC)기술검측저세배병독1형화2형,근거저세배병독적서렬특점설계특이성인물,PCR확증산물경DHPLC기술진행쾌속검측.선택저세소병독、저원배병독Ⅱ형화저위광견병독진행특이성시험,무교차반응.해검측방법구유교호적특이성화중복성;용질립표준품진행TTSuV1화TTSuV2적PCR-DHPLC검측,령민도가체1.0×101고패·μL-1.대80빈혈청양본분별응용실시형광PCR법、PCR-응효전영법급본문소건립적PCR-DHPLC법여진행검측,발현TTSuV1유63빈PCR-DHPLC양성,63빈실시형광PCR양성,54빈PCR응효전영양성;TTSuV2유69빈PCR-DHPLC양성,69빈실시형광PCR양성,56빈PCR-응효전영양성.본시험건립적PCR-DHPLC법구유특이、민감、쾌속、중복성호등우점,가용우TTSuV감염적분자류행병학조사.