CAJ | 학술논문

目的研究小鼠UroplakinⅡ(UPⅡ)启动子在人细胞中的作用.方法采用半定量RT-PCR方法,检测人类膀胱移行细胞癌细胞系(BIU-87)、肾癌细胞系(GRC-1)、脐静脉血管内皮细胞系(EC)、肺癌细胞系(A549)和皮肤成纤维细胞系(Hs27)中UPⅡ基因mRNA的表达情况;同时构建pEGFP-UPⅡ、pGL-UPⅡ重组质粒,应用脂质体转染技术,将重组质粒转染入BIU-87、GRC-1、EC、A549和Hs27;利用共聚焦显微镜、流式细胞仪和微板检测仪观察细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luc)的情况.结果UPⅡ基因mRNA在BIU-87中有较高的表达,而在其他组织细胞中表达极低.BIU-87表达GFP较多(5～10/HP),亮度较强,流式细胞仪测定表达量为10.1%;而GRC-1、EC细胞表达GFP极少(0～2/HP),亮度暗,流式细胞仪测定表达量分别为0%和1.8%.Luc在BIU-87中的表达量是其他组织细胞的1.8～8.2倍,差异有显著性(P<0.01).结论UPⅡ特异性的表达在膀胱癌细胞中.小鼠的UroplakinⅡ启动子在人类细胞中仍具有膀胱特异性的启动活性.
목적연구소서UroplakinⅡ(UPⅡ)계동자재인세포중적작용.방법채용반정량RT-PCR방법,검측인류방광이행세포암세포계(BIU-87)、신암세포계(GRC-1)、제정맥혈관내피세포계(EC)、폐암세포계(A549)화피부성섬유세포계(Hs27)중UPⅡ기인mRNA적표체정황;동시구건pEGFP-UPⅡ、pGL-UPⅡ중조질립,응용지질체전염기술,장중조질립전염입BIU-87、GRC-1、EC、A549화Hs27;이용공취초현미경、류식세포의화미판검측의관찰세포표체록색형광단백(GFP)화형광소매(Luc)적정황.결과UPⅡ기인mRNA재BIU-87중유교고적표체,이재기타조직세포중표체겁저.BIU-87표체GFP교다(5～10/HP),량도교강,류식세포의측정표체량위10.1%;이GRC-1、EC세포표체GFP겁소(0～2/HP),량도암,류식세포의측정표체량분별위0%화1.8%.Luc재BIU-87중적표체량시기타조직세포적1.8～8.2배,차이유현저성(P<0.01).결론UPⅡ특이성적표체재방광암세포중.소서적UroplakinⅡ계동자재인류세포중잉구유방광특이성적계동활성.