生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2003年
5期
364-368
,共5页
EB病毒%早期蛋白P54%原核表达%免疫原性
EB病毒%早期蛋白P54%原覈錶達%免疫原性
EB병독%조기단백P54%원핵표체%면역원성
PCR法获得编码EB病毒早期蛋白P54的基因BMRF1,序列分析后亚克隆入原核表达载体pET30a.表达质粒pET30a-BMRF1在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导后表达了P54抗原,SDS-PAGE表明其相对分子质量为51 000;采用镍离子亲和柱纯化重组蛋白.Western印迹结果表明纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后产生了P54特异性抗体.间接免疫荧光表明免疫血清可以识别激活的Raji细胞中表达的P54蛋白.以上结果表明构建了原核表达质粒pET30a-BMRF1并在大肠杆菌细胞中成功表达EB病毒早期蛋白P54,表达蛋白具有很好的抗原性和免疫原性.
PCR法穫得編碼EB病毒早期蛋白P54的基因BMRF1,序列分析後亞剋隆入原覈錶達載體pET30a.錶達質粒pET30a-BMRF1在大腸桿菌BL21(DE3)菌株中經IPTG誘導後錶達瞭P54抗原,SDS-PAGE錶明其相對分子質量為51 000;採用鎳離子親和柱純化重組蛋白.Western印跡結果錶明純化蛋白免疫BALB/c小鼠後產生瞭P54特異性抗體.間接免疫熒光錶明免疫血清可以識彆激活的Raji細胞中錶達的P54蛋白.以上結果錶明構建瞭原覈錶達質粒pET30a-BMRF1併在大腸桿菌細胞中成功錶達EB病毒早期蛋白P54,錶達蛋白具有很好的抗原性和免疫原性.
PCR법획득편마EB병독조기단백P54적기인BMRF1,서렬분석후아극륭입원핵표체재체pET30a.표체질립pET30a-BMRF1재대장간균BL21(DE3)균주중경IPTG유도후표체료P54항원,SDS-PAGE표명기상대분자질량위51 000;채용얼리자친화주순화중조단백.Western인적결과표명순화단백면역BALB/c소서후산생료P54특이성항체.간접면역형광표명면역혈청가이식별격활적Raji세포중표체적P54단백.이상결과표명구건료원핵표체질립pET30a-BMRF1병재대장간균세포중성공표체EB병독조기단백P54,표체단백구유흔호적항원성화면역원성.
