农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2004年
3期
306-311
,共6页
孙丽英%徐佳凌%方守国%王朝辉%韩成贵%李大伟%于嘉林
孫麗英%徐佳凌%方守國%王朝輝%韓成貴%李大偉%于嘉林
손려영%서가릉%방수국%왕조휘%한성귀%리대위%우가림
水稻黑条矮缩病毒%玉米粗缩病%基因组片段S8和S9%序列分析%原核表达
水稻黑條矮縮病毒%玉米粗縮病%基因組片段S8和S9%序列分析%原覈錶達
수도흑조왜축병독%옥미조축병%기인조편단S8화S9%서렬분석%원핵표체
通过RT-PCR获得了玉米粗缩病病毒湖北分离物(Hbm)基因组片段S8和S9的全长cDNA克隆,并测定了它们的全序列.S8全长1936 bp,其编码链只含1个ORF,编码1个由591个氨基酸组成、分子量约为68 kD蛋白;S9全长1 900bp,含有两个非重叠的ORF,分别编码由347个和209个氨基酸组成、分子量分别约为40 kD和24 kD蛋白.序列分析表明,Hbm-S8和S9与水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)中国不同分离物之间的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为94.4%～98.9%和96.0%～99.0%,且与日本RBSDV的序列同源性高于与玉米粗缩病毒相应片段的序列同源性,进一步证明了引起我国玉米粗缩病的病原为RBSDV.SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,RBSDV 8和9编码的蛋白可在大肠杆菌(Escherichia coli)中高效表达.以这些蛋白为抗原,制备了抗血清.用Westernblot方法在感病的玉米(Zeamays)植株中可检测到RBSDV-Hbm S8和S9ORF1编码的蛋白.
通過RT-PCR穫得瞭玉米粗縮病病毒湖北分離物(Hbm)基因組片段S8和S9的全長cDNA剋隆,併測定瞭它們的全序列.S8全長1936 bp,其編碼鏈隻含1箇ORF,編碼1箇由591箇氨基痠組成、分子量約為68 kD蛋白;S9全長1 900bp,含有兩箇非重疊的ORF,分彆編碼由347箇和209箇氨基痠組成、分子量分彆約為40 kD和24 kD蛋白.序列分析錶明,Hbm-S8和S9與水稻黑條矮縮病毒(RBSDV)中國不同分離物之間的覈苷痠和氨基痠序列同源性分彆為94.4%～98.9%和96.0%～99.0%,且與日本RBSDV的序列同源性高于與玉米粗縮病毒相應片段的序列同源性,進一步證明瞭引起我國玉米粗縮病的病原為RBSDV.SDS-PAGE分析錶明,經IPTG誘導,RBSDV 8和9編碼的蛋白可在大腸桿菌(Escherichia coli)中高效錶達.以這些蛋白為抗原,製備瞭抗血清.用Westernblot方法在感病的玉米(Zeamays)植株中可檢測到RBSDV-Hbm S8和S9ORF1編碼的蛋白.
통과RT-PCR획득료옥미조축병병독호북분리물(Hbm)기인조편단S8화S9적전장cDNA극륭,병측정료타문적전서렬.S8전장1936 bp,기편마련지함1개ORF,편마1개유591개안기산조성、분자량약위68 kD단백;S9전장1 900bp,함유량개비중첩적ORF,분별편마유347개화209개안기산조성、분자량분별약위40 kD화24 kD단백.서렬분석표명,Hbm-S8화S9여수도흑조왜축병독(RBSDV)중국불동분리물지간적핵감산화안기산서렬동원성분별위94.4%～98.9%화96.0%～99.0%,차여일본RBSDV적서렬동원성고우여옥미조축병독상응편단적서렬동원성,진일보증명료인기아국옥미조축병적병원위RBSDV.SDS-PAGE분석표명,경IPTG유도,RBSDV 8화9편마적단백가재대장간균(Escherichia coli)중고효표체.이저사단백위항원,제비료항혈청.용Westernblot방법재감병적옥미(Zeamays)식주중가검측도RBSDV-Hbm S8화S9ORF1편마적단백.
