生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
5-8
,共4页
曹志国%张进%周煜%王艳%赵庆国%卢柏松%黄培堂
曹誌國%張進%週煜%王豔%趙慶國%盧柏鬆%黃培堂
조지국%장진%주욱%왕염%조경국%로백송%황배당
GGN3%GGNBP2%酵母双杂交%免疫共沉淀
GGN3%GGNBP2%酵母雙雜交%免疫共沉澱
GGN3%GGNBP2%효모쌍잡교%면역공침정
生殖细胞缺陷症(gcd)小鼠突变体是上世纪90年代初发现的一种不育突变小鼠,FancL(也叫Pog)的缺失是产生gcd突变小鼠的原因.FANCL是一种含有PHD结构域的泛素E3连接酶,是Fanconi贫血复合物中的组分之一.在生殖细胞中,FANCL与GGN1和GGN3相互作用,而GGN1和GGN3蛋白的功能还不清楚.为了研究GGN3的功能,揭示更多的参与该过程的蛋白质,运用Clontech公司新开发的第三套酵母双杂交系统以GGN3为诱饵从成年小鼠睾丸cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白分子.发现了一个精子生成期间在睾丸中特异性高表达的基因Ggnbp2,免疫共沉淀分析表明,Ggnbp2编码的蛋白质产物GGNBP2在哺乳动物细胞中与GGN3特异相互作用.通过构建突变体,确定了GGNBP2蛋白与GGN3相互作用的区域.以上结果为揭示GGN3和GGNBP2在生殖发育中的功能、丰富生殖细胞发育的蛋白调控网络及其调控规律奠定了一定的基础.
生殖細胞缺陷癥(gcd)小鼠突變體是上世紀90年代初髮現的一種不育突變小鼠,FancL(也叫Pog)的缺失是產生gcd突變小鼠的原因.FANCL是一種含有PHD結構域的汎素E3連接酶,是Fanconi貧血複閤物中的組分之一.在生殖細胞中,FANCL與GGN1和GGN3相互作用,而GGN1和GGN3蛋白的功能還不清楚.為瞭研究GGN3的功能,揭示更多的參與該過程的蛋白質,運用Clontech公司新開髮的第三套酵母雙雜交繫統以GGN3為誘餌從成年小鼠睪汍cDNA文庫中篩選與其相互作用的蛋白分子.髮現瞭一箇精子生成期間在睪汍中特異性高錶達的基因Ggnbp2,免疫共沉澱分析錶明,Ggnbp2編碼的蛋白質產物GGNBP2在哺乳動物細胞中與GGN3特異相互作用.通過構建突變體,確定瞭GGNBP2蛋白與GGN3相互作用的區域.以上結果為揭示GGN3和GGNBP2在生殖髮育中的功能、豐富生殖細胞髮育的蛋白調控網絡及其調控規律奠定瞭一定的基礎.
생식세포결함증(gcd)소서돌변체시상세기90년대초발현적일충불육돌변소서,FancL(야규Pog)적결실시산생gcd돌변소서적원인.FANCL시일충함유PHD결구역적범소E3련접매,시Fanconi빈혈복합물중적조분지일.재생식세포중,FANCL여GGN1화GGN3상호작용,이GGN1화GGN3단백적공능환불청초.위료연구GGN3적공능,게시경다적삼여해과정적단백질,운용Clontech공사신개발적제삼투효모쌍잡교계통이GGN3위유이종성년소서고환cDNA문고중사선여기상호작용적단백분자.발현료일개정자생성기간재고환중특이성고표체적기인Ggnbp2,면역공침정분석표명,Ggnbp2편마적단백질산물GGNBP2재포유동물세포중여GGN3특이상호작용.통과구건돌변체,학정료GGNBP2단백여GGN3상호작용적구역.이상결과위게시GGN3화GGNBP2재생식발육중적공능、봉부생식세포발육적단백조공망락급기조공규률전정료일정적기출.
