中国烟草学报
中國煙草學報
중국연초학보
ACTA TABACARIA SINICA
2005年
4期
33-38
,共6页
梁景霞%祁建民%吴为人%周东新%陈顺辉%王涛%陶爱芬
樑景霞%祁建民%吳為人%週東新%陳順輝%王濤%陶愛芬
량경하%기건민%오위인%주동신%진순휘%왕도%도애분
烟草%DNA提取%SRAP反应体系
煙草%DNA提取%SRAP反應體繫
연초%DNA제취%SRAP반응체계
以10个烟草栽培品种为试验材料,研究了烟草DNA的提取方法以及对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度实验,筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应条件:在25μL的反应体系中,MgCl2 2.0 mmol、dNTP200μmol,上下引物各30ng、DNA模板40ng、DNA聚合酶1.5U,扩增程序为:在94℃预变性5min,反应前5个循环在94℃1min,33℃1min,72℃1min条件下运行;随后的30个循环复性温度提高到53℃,最后72℃延伸5min.本文还讨论了不同分子标记在烟草中应用的优缺点以及SRAP分子标记在烟草上的应用前景,提出了应用SRAP分子标记构建烟草遗传图谱的可行性.
以10箇煙草栽培品種為試驗材料,研究瞭煙草DNA的提取方法以及對建立煙草SRAP-PCR反應體繫的影響因子設置梯度實驗,篩選和建立可擴增多態性高、重複性好、帶型清晰的最佳SRAP-PCR反應條件:在25μL的反應體繫中,MgCl2 2.0 mmol、dNTP200μmol,上下引物各30ng、DNA模闆40ng、DNA聚閤酶1.5U,擴增程序為:在94℃預變性5min,反應前5箇循環在94℃1min,33℃1min,72℃1min條件下運行;隨後的30箇循環複性溫度提高到53℃,最後72℃延伸5min.本文還討論瞭不同分子標記在煙草中應用的優缺點以及SRAP分子標記在煙草上的應用前景,提齣瞭應用SRAP分子標記構建煙草遺傳圖譜的可行性.
이10개연초재배품충위시험재료,연구료연초DNA적제취방법이급대건립연초SRAP-PCR반응체계적영향인자설치제도실험,사선화건립가확증다태성고、중복성호、대형청석적최가SRAP-PCR반응조건:재25μL적반응체계중,MgCl2 2.0 mmol、dNTP200μmol,상하인물각30ng、DNA모판40ng、DNA취합매1.5U,확증정서위:재94℃예변성5min,반응전5개순배재94℃1min,33℃1min,72℃1min조건하운행;수후적30개순배복성온도제고도53℃,최후72℃연신5min.본문환토론료불동분자표기재연초중응용적우결점이급SRAP분자표기재연초상적응용전경,제출료응용SRAP분자표기구건연초유전도보적가행성.
