CAJ | 학술논문

两步法扩增诱导脐血及动员外周血CD34+细胞来源树突状细胞的比较
량보법확증유도제혈급동원외주혈CD34+세포래원수돌상세포적비교
Comparison of Expanding Dendritic Cells Derived from Cord Blood and Mobilized Peripheral Blood by Two-step Culture Method

万方数据

中国实验血液学杂志中國實驗血液學雜誌 중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2006年 6期 1163-1167 ,共5页

王亚非%孟恒星%葛薇%于珍%李云涛%李桥川%万长春%徐燕%李新%李增军%王国蓉%尤胜国%邱录贵

왕아비%맹항성%갈미%우진%리운도%리교천%만장춘%서연%리신%리증군%왕국용%우성국%구록귀

树突状细胞%脐血%动员外周血%CD34+细胞%两步法培养法樹突狀細胞%臍血%動員外週血%CD34+細胞%兩步法培養法
수돌상세포%제혈%동원외주혈%CD34+세포%량보법배양법

为了比较先扩增、后诱导的两步法从脐血(CB)CD34+细胞和动员外周血(MPB)CD34+细胞诱导所得DC的产量及功能,将免疫磁珠分选获得的CB-CD34+细胞和MPB-CD34+细胞用FL、TPO、SCF、GM-CSF等细胞因子先扩增10天,然后加入GM-CSF、IL-4及TNF-α、CD40Ab、PGE2等细胞因子组合诱导获得DC.采用流式细胞仪检测DC表型,混合淋巴细胞培养检测DC刺激异基因T细胞增殖能力,ELISA法检测DC分泌IL-12能力,Transwell板检测DC在次级淋巴组织趋化因子(SLC)介导下的趋化功能.结果表明: ①扩增10天时CB组、MPB组细胞中CD14+CD1a-细胞含量无显著差异[(40.48±16.85)% vs (28.07±23.19)%, P＞0.05].但由于CB组细胞扩增倍数显著高于MPB组(388.88±84.63倍vs 79.67±10.32倍, P＜0.01),CB组CD14+CD1a-细胞扩增倍数显著高于MPB组(189.42±25.02倍vs 28.74±23.27倍, P＜0.01); ②TNF-α/CD40Ab/PGE2条件下与TNF-α条件下相比,CB组和MPB组所得DC均表达更高的CD83[分别为(34.52±11.22)% vs (3.70±2.27)%、(36.69±13.36)% vs (7.34±3.364)%, P均＜0.01]; ③CB组与MPB组在TNF-α/CD40Ab/PGE2诱导条件下所得DC均高水平表达CD83、CD86、HLA-DR、CD11c、CD54、CD40,CB组所得CD83+细胞的扩增倍数显著高于MPB组(198.72±117.53倍vs 33.95±6.19倍,P＜0.01); ④CD40Ab/PGE2/TNF-α条件下CB与MPB来源的DC在刺激异基因T细胞增殖、IL-12的分泌[(16.2±4.31)pg/ml vs (13.5±4.1)pg/ml]以及SLC介导的迁移率[(28.09±7.76)% vs (18.5±3.47)%]上均无显著差别(P均＞0.05).结论: 在两步法培养体系下,CB-CD34+细胞与MPB-CD34+细胞来源的DC具有相同的功能,而前者产量显著高于后者.
위료비교선확증、후유도적량보법종제혈(CB)CD34+세포화동원외주혈(MPB)CD34+세포유도소득DC적산량급공능,장면역자주분선획득적CB-CD34+세포화MPB-CD34+세포용FL、TPO、SCF、GM-CSF등세포인자선확증10천,연후가입GM-CSF、IL-4급TNF-α、CD40Ab、PGE2등세포인자조합유도획득DC.채용류식세포의검측DC표형,혼합림파세포배양검측DC자격이기인T세포증식능력,ELISA법검측DC분비IL-12능력,Transwell판검측DC재차급림파조직추화인자(SLC)개도하적추화공능.결과표명: ①확증10천시CB조、MPB조세포중CD14+CD1a-세포함량무현저차이[(40.48±16.85)% vs (28.07±23.19)%, P＞0.05].단유우CB조세포확증배수현저고우MPB조(388.88±84.63배vs 79.67±10.32배, P＜0.01),CB조CD14+CD1a-세포확증배수현저고우MPB조(189.42±25.02배vs 28.74±23.27배, P＜0.01); ②TNF-α/CD40Ab/PGE2조건하여TNF-α조건하상비,CB조화MPB조소득DC균표체경고적CD83[분별위(34.52±11.22)% vs (3.70±2.27)%、(36.69±13.36)% vs (7.34±3.364)%, P균＜0.01]; ③CB조여MPB조재TNF-α/CD40Ab/PGE2유도조건하소득DC균고수평표체CD83、CD86、HLA-DR、CD11c、CD54、CD40,CB조소득CD83+세포적확증배수현저고우MPB조(198.72±117.53배vs 33.95±6.19배,P＜0.01); ④CD40Ab/PGE2/TNF-α조건하CB여MPB래원적DC재자격이기인T세포증식、IL-12적분비[(16.2±4.31)pg/ml vs (13.5±4.1)pg/ml]이급SLC개도적천이솔[(28.09±7.76)% vs (18.5±3.47)%]상균무현저차별(P균＞0.05).결론: 재량보법배양체계하,CB-CD34+세포여MPB-CD34+세포래원적DC구유상동적공능,이전자산량현저고우후자.