CAJ | 학술논문

目的:体外分离培养人视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞(RTSC),建立RTSC的鉴定方法.方法:新鲜Rb组织经酶消化法获取单个瘤细胞,接种于无血清化学限定培养基培养.对培养7-15 d的神经样球体,分别进行克隆形成、增殖能力、分化能力等干细胞特性鉴定;采用RT-PCR及免疫荧光等方法对RTSC及其分化细胞的特性进行鉴定.结果:Rb肿瘤在无血清培养基中可以形成神经球体样肿瘤球体,后者可以多次传代,具有自我再续能力.RTSC来源的神经球体表达神经干细胞或视网膜早期发育的相关基因Nestin、CD133、Bmi-1、Pax6、RX及Chx10.在分化培养基上,肿瘤球体内细胞可以向神经元和胶质细胞分化,形成神经网络样结构,该分化细胞部分表达GFAP、MAP2、GAP43、PKC-a、Syntaxin及Recoverin等.RTSC分化后的神经样细胞为谷氨酸能神经元细胞.结论:本结果揭示Rb中存在具有自我增殖及分化能力的视网膜前体细胞样的肿瘤干细胞.此类细胞可能是Rb恶性增殖的根源,也将成为Rb治疗的新靶点.
목적:체외분리배양인시망막모세포류종류간세포(RTSC),건립RTSC적감정방법.방법:신선Rb조직경매소화법획취단개류세포,접충우무혈청화학한정배양기배양.대배양7-15 d적신경양구체,분별진행극륭형성、증식능력、분화능력등간세포특성감정;채용RT-PCR급면역형광등방법대RTSC급기분화세포적특성진행감정.결과:Rb종류재무혈청배양기중가이형성신경구체양종류구체,후자가이다차전대,구유자아재속능력.RTSC래원적신경구체표체신경간세포혹시망막조기발육적상관기인Nestin、CD133、Bmi-1、Pax6、RX급Chx10.재분화배양기상,종류구체내세포가이향신경원화효질세포분화,형성신경망락양결구,해분화세포부분표체GFAP、MAP2、GAP43、PKC-a、Syntaxin급Recoverin등.RTSC분화후적신경양세포위곡안산능신경원세포.결론:본결과게시Rb중존재구유자아증식급분화능력적시망막전체세포양적종류간세포.차류세포가능시Rb악성증식적근원,야장성위Rb치료적신파점.