中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
10期
728-730,724,封4
,共5页
林森%刘霞%孔德晓%曲云东%张利宁%张源朝
林森%劉霞%孔德曉%麯雲東%張利寧%張源朝
림삼%류하%공덕효%곡운동%장리저%장원조
caspase-8%RNA干扰%凋亡
caspase-8%RNA榦擾%凋亡
caspase-8%RNA간우%조망
目的 研究针对caspase-8 mRNA的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体对肝Hepa 1-6细胞凋亡的干扰作用.方法 TNF-α诱导Hepa 1-6细胞凋亡,脂质体法将shRNA表达载体转染入Hepa 1-6细胞中,24 h后应用荧光实时定量PCR和Western blot法分别在mRNA和蛋白水平测定其caspase-8表达差异,流式细胞仪观察细胞凋亡的变化. 结果 TNF-α作用后Hepa 1-6细胞caspase-8 mRNA由(0.050±0.006)升高至(0.286±0.063) (P<0.01),而shRNA表达载体Pgenesil-casp8使其下降至(0.098±0.037) (P<0.01).转染Pgenesil-casp8重组质粒后caspase-8蛋白表达与mRNA荧光实时定量PCR结果吻合. TNF-α诱导Hepa 1-6细胞凋亡率由(4.70±0.89)%升高至(17.40±2.21)%(P<0.01),Pgenesil-casp8作用后下降至(1.20±0.32)%(P<0.05). 结论 针对caspase-8 mRNA的shRNA真核表达载体可有效抑制肝细胞Hepa 1-6凋亡.
目的 研究針對caspase-8 mRNA的小髮夾RNA(shRNA)真覈錶達載體對肝Hepa 1-6細胞凋亡的榦擾作用.方法 TNF-α誘導Hepa 1-6細胞凋亡,脂質體法將shRNA錶達載體轉染入Hepa 1-6細胞中,24 h後應用熒光實時定量PCR和Western blot法分彆在mRNA和蛋白水平測定其caspase-8錶達差異,流式細胞儀觀察細胞凋亡的變化. 結果 TNF-α作用後Hepa 1-6細胞caspase-8 mRNA由(0.050±0.006)升高至(0.286±0.063) (P<0.01),而shRNA錶達載體Pgenesil-casp8使其下降至(0.098±0.037) (P<0.01).轉染Pgenesil-casp8重組質粒後caspase-8蛋白錶達與mRNA熒光實時定量PCR結果吻閤. TNF-α誘導Hepa 1-6細胞凋亡率由(4.70±0.89)%升高至(17.40±2.21)%(P<0.01),Pgenesil-casp8作用後下降至(1.20±0.32)%(P<0.05). 結論 針對caspase-8 mRNA的shRNA真覈錶達載體可有效抑製肝細胞Hepa 1-6凋亡.
목적 연구침대caspase-8 mRNA적소발협RNA(shRNA)진핵표체재체대간Hepa 1-6세포조망적간우작용.방법 TNF-α유도Hepa 1-6세포조망,지질체법장shRNA표체재체전염입Hepa 1-6세포중,24 h후응용형광실시정량PCR화Western blot법분별재mRNA화단백수평측정기caspase-8표체차이,류식세포의관찰세포조망적변화. 결과 TNF-α작용후Hepa 1-6세포caspase-8 mRNA유(0.050±0.006)승고지(0.286±0.063) (P<0.01),이shRNA표체재체Pgenesil-casp8사기하강지(0.098±0.037) (P<0.01).전염Pgenesil-casp8중조질립후caspase-8단백표체여mRNA형광실시정량PCR결과문합. TNF-α유도Hepa 1-6세포조망솔유(4.70±0.89)%승고지(17.40±2.21)%(P<0.01),Pgenesil-casp8작용후하강지(1.20±0.32)%(P<0.05). 결론 침대caspase-8 mRNA적shRNA진핵표체재체가유효억제간세포Hepa 1-6조망.