中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2010年
4期
502-504
,共3页
载体构建%RNA干扰%ROCK(Rho激酶)
載體構建%RNA榦擾%ROCK(Rho激酶)
재체구건%RNA간우%ROCK(Rho격매)
目的 构建表达Rho激酶(ROCK)-Ⅱ特异性siRNA的重组质粒.方法 按照Elbashir等设计原则和siRNA表达载体的要求,利用Ambion公司在线siRNA Tatget finder软件,设计带有BamH I、Bbs I酶切黏性末端、终止识别序列和LOOP环的shRNA,并将其克隆入载体pGPU6/GFP/Neo,构建成ROCK-Ⅱ特异siRNA重组质粒,然后进行酶切鉴定及基因测序.结果 设计的shRNA成功克隆入载体pGPU6/GFP/Neo,构建成ROCK-Ⅱ特异siRNA重组质粒,酶切鉴定及基因测序表明设计序列完全相符,目的 基因序列准确无误.结论 重组质粒构建成功,为今后体外或体内研究ROCK基因在脊髓损伤后的功能修复提供了一种有效的方法.
目的 構建錶達Rho激酶(ROCK)-Ⅱ特異性siRNA的重組質粒.方法 按照Elbashir等設計原則和siRNA錶達載體的要求,利用Ambion公司在線siRNA Tatget finder軟件,設計帶有BamH I、Bbs I酶切黏性末耑、終止識彆序列和LOOP環的shRNA,併將其剋隆入載體pGPU6/GFP/Neo,構建成ROCK-Ⅱ特異siRNA重組質粒,然後進行酶切鑒定及基因測序.結果 設計的shRNA成功剋隆入載體pGPU6/GFP/Neo,構建成ROCK-Ⅱ特異siRNA重組質粒,酶切鑒定及基因測序錶明設計序列完全相符,目的 基因序列準確無誤.結論 重組質粒構建成功,為今後體外或體內研究ROCK基因在脊髓損傷後的功能脩複提供瞭一種有效的方法.
목적 구건표체Rho격매(ROCK)-Ⅱ특이성siRNA적중조질립.방법 안조Elbashir등설계원칙화siRNA표체재체적요구,이용Ambion공사재선siRNA Tatget finder연건,설계대유BamH I、Bbs I매절점성말단、종지식별서렬화LOOP배적shRNA,병장기극륭입재체pGPU6/GFP/Neo,구건성ROCK-Ⅱ특이siRNA중조질립,연후진행매절감정급기인측서.결과 설계적shRNA성공극륭입재체pGPU6/GFP/Neo,구건성ROCK-Ⅱ특이siRNA중조질립,매절감정급기인측서표명설계서렬완전상부,목적 기인서렬준학무오.결론 중조질립구건성공,위금후체외혹체내연구ROCK기인재척수손상후적공능수복제공료일충유효적방법.
