动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2010年
2期
60-64
,共5页
甄洪花%沈志强%单虎%王金良
甄洪花%瀋誌彊%單虎%王金良
견홍화%침지강%단호%왕금량
猪白细胞介素2%猪白细胞介素6%原核表达%多克隆抗体
豬白細胞介素2%豬白細胞介素6%原覈錶達%多剋隆抗體
저백세포개소2%저백세포개소6%원핵표체%다극륭항체
IL-2和IL-6是机体重要的免疫调节因子,在佐剂的应用方面具有很好的发展前景.论文以pTIL-2和pTIL-6为模板进行PCR扩增得到猪白细胞介素2(pIL-2)和猪白细胞介素6(pIL-6)的全基因序列,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及连接反应将目的基因亚克隆到原核表达载体pET30a中构建了融合表达质粒pETIL-2和pETIL-6.将重组质粒分别转化大肠埃希菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3),37 ℃在IPTG诱导下高效表达了pIL-2和pIL-6,分子质量分别约为26 ku和30 ku.将包涵体纯化并复性后免疫家兔,制备的兔抗pIL-2和pIL-6的多克隆抗体经ELISA检测效价在1:12 800以上.
IL-2和IL-6是機體重要的免疫調節因子,在佐劑的應用方麵具有很好的髮展前景.論文以pTIL-2和pTIL-6為模闆進行PCR擴增得到豬白細胞介素2(pIL-2)和豬白細胞介素6(pIL-6)的全基因序列,通過EcoRⅠ和HindⅢ雙酶切及連接反應將目的基因亞剋隆到原覈錶達載體pET30a中構建瞭融閤錶達質粒pETIL-2和pETIL-6.將重組質粒分彆轉化大腸埃希菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3),37 ℃在IPTG誘導下高效錶達瞭pIL-2和pIL-6,分子質量分彆約為26 ku和30 ku.將包涵體純化併複性後免疫傢兔,製備的兔抗pIL-2和pIL-6的多剋隆抗體經ELISA檢測效價在1:12 800以上.
IL-2화IL-6시궤체중요적면역조절인자,재좌제적응용방면구유흔호적발전전경.논문이pTIL-2화pTIL-6위모판진행PCR확증득도저백세포개소2(pIL-2)화저백세포개소6(pIL-6)적전기인서렬,통과EcoRⅠ화HindⅢ쌍매절급련접반응장목적기인아극륭도원핵표체재체pET30a중구건료융합표체질립pETIL-2화pETIL-6.장중조질립분별전화대장애희균BL21(DE3)화Rosetta(DE3),37 ℃재IPTG유도하고효표체료pIL-2화pIL-6,분자질량분별약위26 ku화30 ku.장포함체순화병복성후면역가토,제비적토항pIL-2화pIL-6적다극륭항체경ELISA검측효개재1:12 800이상.
