经济动物学报
經濟動物學報
경제동물학보
JOURNAL OF ECONOMIC ANIMAL
2010年
1期
26-29
,共4页
储结园%王海军%王春雨%陈迪%王全凯
儲結園%王海軍%王春雨%陳迪%王全凱
저결완%왕해군%왕춘우%진적%왕전개
H5N1%禽流感%基质蛋白M1%原核表达%纯化
H5N1%禽流感%基質蛋白M1%原覈錶達%純化
H5N1%금류감%기질단백M1%원핵표체%순화
为获得纯度大于90%的M1蛋白,构建重组质粒PET-22b-M1,将正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测分析表达形式和表达量,并经Ni2+柱亲和层析与柱层析纯化表达蛋白.结果表明:试验成功构建了pET-22b-M1表达载体;IPTG诱导后高效表达出分子质量约为28 ku的M1融合蛋白;纯化的目的蛋白在SDS-PAGE图谱上呈单一条带,且获得的M1蛋白纯度达95.4%.
為穫得純度大于90%的M1蛋白,構建重組質粒PET-22b-M1,將正確的重組質粒轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中,IPTG誘導錶達,經SDS-PAGE檢測分析錶達形式和錶達量,併經Ni2+柱親和層析與柱層析純化錶達蛋白.結果錶明:試驗成功構建瞭pET-22b-M1錶達載體;IPTG誘導後高效錶達齣分子質量約為28 ku的M1融閤蛋白;純化的目的蛋白在SDS-PAGE圖譜上呈單一條帶,且穫得的M1蛋白純度達95.4%.
위획득순도대우90%적M1단백,구건중조질립PET-22b-M1,장정학적중조질립전화도대장간균BL21(DE3)중,IPTG유도표체,경SDS-PAGE검측분석표체형식화표체량,병경Ni2+주친화층석여주층석순화표체단백.결과표명:시험성공구건료pET-22b-M1표체재체;IPTG유도후고효표체출분자질량약위28 ku적M1융합단백;순화적목적단백재SDS-PAGE도보상정단일조대,차획득적M1단백순도체95.4%.