CAJ | 학술논문

为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(mDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-VP3,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)PlysS,经IPTG诱导,得到可溶性表达的融合蛋白SUMO-VP3.结果表明,该融合蛋白表达量占细菌总蛋白35%,经His Trap<'TM> FF crude column层析柱纯化后的SUMO-VP3蛋白可被SUMO蛋白酶I有效切割,获得无标签的VP3蛋白,经western blot 鉴定表明该VP3蛋白具有良好的抗原性.本研究表明pHisSUMO Express表达系统是高效可溶表达外源蛋白的有效工具,所表达的病毒蛋白具有良好的抗原性,为病原诊断抗原的研究和制备提供有效表达系统.
위평개SUMO원핵표체계통(pHisSUMO Express)대병독기인적가용성표체,본연구종인공접충발병적계전염성법씨낭병(IBD)적병료조직양품중제취총RNA,통과RT-PCR확증IBD병독(mDV)VP3기인,병장기극륭우pHisSUMO중구건료중조표체질립pHisSUMO-VP3,전화대장간균Rosetta(DE3)PlysS,경IPTG유도,득도가용성표체적융합단백SUMO-VP3.결과표명,해융합단백표체량점세균총단백35%,경His Trap<'TM> FF crude column층석주순화후적SUMO-VP3단백가피SUMO단백매I유효절할,획득무표첨적VP3단백,경western blot 감정표명해VP3단백구유량호적항원성.본연구표명pHisSUMO Express표체계통시고효가용표체외원단백적유효공구,소표체적병독단백구유량호적항원성,위병원진단항원적연구화제비제공유효표체계통.