CAJ | 학술논문

为了探讨不同PCR检测方法的灵敏度,分别利用TaqMan实时定量PCR、世界动物卫生组织(OIE)公布的巢式PCR引物(简称OIE)、黄海水产研究所种质资源与工程育种研究室(GB)设计的引物(简称GB)及2种巢式PCR对应的一步法PCR,对具有不同白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)含量的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)样品进行检测.结果显示,当使用已知病毒含量的标准品进行检测时,TaqMan实时定量PCR方法可以检测到l0个WSSV拷贝;OIE巢式PCR与GB巢式PCR方法分别可检测到104和103个WSSV拷贝;单独使用OIE巢式PCR的外引物和内引物扩增时,分别可检测到5×104和2.5×104个WSSV拷贝;单独使用GB巢式PCR的外引物和内引物进行一步法PCR扩增时,分别可检测到104和5×103个WSSV拷贝.使用上述PCR方法分别对44份未知WSSV含量的样品进行验证,定量PCR方法检测阳性率为84.09%,OIE巢式PCR与GB巢式PCR方法检测的阳性率分别为18.18%和27.27%;单独使用OIE巢式PCR的外引物和内引物扩增检测的阳性率均为15.91%;单独使用GB巢式PCR的外引物和内引物扩增检测的阳性率分别为18.18%和20.45%.根据以上结果,PCR方法检测WSSV的灵敏度由高到低依次为:定量PCR、巢式PCR、一步法PCR.
위료탐토불동PCR검측방법적령민도,분별이용TaqMan실시정량PCR、세계동물위생조직(OIE)공포적소식PCR인물(간칭OIE)、황해수산연구소충질자원여공정육충연구실(GB)설계적인물(간칭GB)급2충소식PCR대응적일보법PCR,대구유불동백반종합정병독(White Spot Syndrome Virus,WSSV)함량적중국명대하(Fenneropenaeus chinensis)양품진행검측.결과현시,당사용이지병독함량적표준품진행검측시,TaqMan실시정량PCR방법가이검측도l0개WSSV고패;OIE소식PCR여GB소식PCR방법분별가검측도104화103개WSSV고패;단독사용OIE소식PCR적외인물화내인물확증시,분별가검측도5×104화2.5×104개WSSV고패;단독사용GB소식PCR적외인물화내인물진행일보법PCR확증시,분별가검측도104화5×103개WSSV고패.사용상술PCR방법분별대44빈미지WSSV함량적양품진행험증,정량PCR방법검측양성솔위84.09%,OIE소식PCR여GB소식PCR방법검측적양성솔분별위18.18%화27.27%;단독사용OIE소식PCR적외인물화내인물확증검측적양성솔균위15.91%;단독사용GB소식PCR적외인물화내인물확증검측적양성솔분별위18.18%화20.45%.근거이상결과,PCR방법검측WSSV적령민도유고도저의차위:정량PCR、소식PCR、일보법PCR.