热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2012年
6期
1077-1083
,共7页
朱高浦%李纪元%范正琪%倪穗%李辛雷%周兴文%孙迎坤
硃高浦%李紀元%範正琪%倪穗%李辛雷%週興文%孫迎坤
주고포%리기원%범정기%예수%리신뢰%주흥문%손영곤
重瓣%山茶花%B-function基因%生物信息学分析%原核表达
重瓣%山茶花%B-function基因%生物信息學分析%原覈錶達
중판%산다화%B-function기인%생물신식학분석%원핵표체
对山茶重瓣花‘红十八学士’(Camellia japonica‘Hong Shibaxueshi’)中的4个B类功能基因构建了系统进化树,预测了其蛋白结构,并构建了相应的原核表达载体.生物信息学分析结果表明:4个基因分属3个亚家族,其中CjHGLO1和CjHGLO2属PI亚家族,CjHTM6属TM6-1ike亚家族,CjHDEF属AP3亚家族;4个基因的编码蛋白均为不稳定蛋白,均无信号肽存在;其蛋白二、三级结构均以α-螺旋为主,其次是无规则卷曲,然后以延伸链三种构象形式存在;分析的特定位点中磷酸化位点数量最多,尤其是蛋白激酶C磷酸化位点最多.原核表达实验结果显示:当IPTG浓度在0.2 mmol/L、30℃、经1h诱导CjHGL01蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.1 mmol/L、30℃、诱导1.5 h CjHGLO2蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.5 mmol/L、16℃、过夜(>16 h)诱导CjHDEF蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.3 mmol/L、20℃、诱导5 h CjHTM6蛋白可获表达.这些研究为山茶B-function基因的更深入研究奠定了基础.
對山茶重瓣花‘紅十八學士’(Camellia japonica‘Hong Shibaxueshi’)中的4箇B類功能基因構建瞭繫統進化樹,預測瞭其蛋白結構,併構建瞭相應的原覈錶達載體.生物信息學分析結果錶明:4箇基因分屬3箇亞傢族,其中CjHGLO1和CjHGLO2屬PI亞傢族,CjHTM6屬TM6-1ike亞傢族,CjHDEF屬AP3亞傢族;4箇基因的編碼蛋白均為不穩定蛋白,均無信號肽存在;其蛋白二、三級結構均以α-螺鏇為主,其次是無規則捲麯,然後以延伸鏈三種構象形式存在;分析的特定位點中燐痠化位點數量最多,尤其是蛋白激酶C燐痠化位點最多.原覈錶達實驗結果顯示:噹IPTG濃度在0.2 mmol/L、30℃、經1h誘導CjHGL01蛋白可穫錶達;噹IPTG濃度在0.1 mmol/L、30℃、誘導1.5 h CjHGLO2蛋白可穫錶達;噹IPTG濃度在0.5 mmol/L、16℃、過夜(>16 h)誘導CjHDEF蛋白可穫錶達;噹IPTG濃度在0.3 mmol/L、20℃、誘導5 h CjHTM6蛋白可穫錶達.這些研究為山茶B-function基因的更深入研究奠定瞭基礎.
대산다중판화‘홍십팔학사’(Camellia japonica‘Hong Shibaxueshi’)중적4개B류공능기인구건료계통진화수,예측료기단백결구,병구건료상응적원핵표체재체.생물신식학분석결과표명:4개기인분속3개아가족,기중CjHGLO1화CjHGLO2속PI아가족,CjHTM6속TM6-1ike아가족,CjHDEF속AP3아가족;4개기인적편마단백균위불은정단백,균무신호태존재;기단백이、삼급결구균이α-라선위주,기차시무규칙권곡,연후이연신련삼충구상형식존재;분석적특정위점중린산화위점수량최다,우기시단백격매C린산화위점최다.원핵표체실험결과현시:당IPTG농도재0.2 mmol/L、30℃、경1h유도CjHGL01단백가획표체;당IPTG농도재0.1 mmol/L、30℃、유도1.5 h CjHGLO2단백가획표체;당IPTG농도재0.5 mmol/L、16℃、과야(>16 h)유도CjHDEF단백가획표체;당IPTG농도재0.3 mmol/L、20℃、유도5 h CjHTM6단백가획표체.저사연구위산다B-function기인적경심입연구전정료기출.