解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2003年
7期
590-591
,共2页
程飚%付小兵%盛志勇%张萍%孟晋红
程飚%付小兵%盛誌勇%張萍%孟晉紅
정표%부소병%성지용%장평%맹진홍
丝裂素活化蛋白激酶%创伤与损伤%信号传递%成纤维细胞
絲裂素活化蛋白激酶%創傷與損傷%信號傳遞%成纖維細胞
사렬소활화단백격매%창상여손상%신호전체%성섬유세포
利用已建立的成纤维细胞热损伤诱导凋亡模型观察离体培养的成纤维细胞热烫伤后信号通路的活化情况.首先将原代培养的人成纤维细胞经5～6传代后,45℃水中孵育10min,造成单纯热损伤刺激,加入5%小牛血清继续培养,分别在伤后0、30、60和180min 4个时相点冻存细胞,运用Western blot进行MAPKs信号通路磷酸化蛋白印迹检测,同时采用荧光显微镜检测热损伤成纤维细胞caspase3蛋白的表达情况.结果显示,经过热损伤刺激的成纤维细胞,c-jun N末端激酶(JNK)首先开始表达,并在60min达到高峰,能持续至180min.细胞外信号调节激酶(ERK)的表达高峰在伤后30min,随后迅速消退.损伤早期,成纤维细胞内caspase3阳性标记的细胞数较少,至伤后60min,caspase3的表达明显增强.研究表明,ERK和JNK信号通路在热损伤诱导成纤维细胞生物学特性变化过程中具有重要意义.
利用已建立的成纖維細胞熱損傷誘導凋亡模型觀察離體培養的成纖維細胞熱燙傷後信號通路的活化情況.首先將原代培養的人成纖維細胞經5～6傳代後,45℃水中孵育10min,造成單純熱損傷刺激,加入5%小牛血清繼續培養,分彆在傷後0、30、60和180min 4箇時相點凍存細胞,運用Western blot進行MAPKs信號通路燐痠化蛋白印跡檢測,同時採用熒光顯微鏡檢測熱損傷成纖維細胞caspase3蛋白的錶達情況.結果顯示,經過熱損傷刺激的成纖維細胞,c-jun N末耑激酶(JNK)首先開始錶達,併在60min達到高峰,能持續至180min.細胞外信號調節激酶(ERK)的錶達高峰在傷後30min,隨後迅速消退.損傷早期,成纖維細胞內caspase3暘性標記的細胞數較少,至傷後60min,caspase3的錶達明顯增彊.研究錶明,ERK和JNK信號通路在熱損傷誘導成纖維細胞生物學特性變化過程中具有重要意義.
이용이건립적성섬유세포열손상유도조망모형관찰리체배양적성섬유세포열탕상후신호통로적활화정황.수선장원대배양적인성섬유세포경5～6전대후,45℃수중부육10min,조성단순열손상자격,가입5%소우혈청계속배양,분별재상후0、30、60화180min 4개시상점동존세포,운용Western blot진행MAPKs신호통로린산화단백인적검측,동시채용형광현미경검측열손상성섬유세포caspase3단백적표체정황.결과현시,경과열손상자격적성섬유세포,c-jun N말단격매(JNK)수선개시표체,병재60min체도고봉,능지속지180min.세포외신호조절격매(ERK)적표체고봉재상후30min,수후신속소퇴.손상조기,성섬유세포내caspase3양성표기적세포수교소,지상후60min,caspase3적표체명현증강.연구표명,ERK화JNK신호통로재열손상유도성섬유세포생물학특성변화과정중구유중요의의.
