临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2010年
3期
196-202
,共7页
胰腺肿瘤%基质金属蛋白酶-2%小干扰RNA
胰腺腫瘤%基質金屬蛋白酶-2%小榦擾RNA
이선종류%기질금속단백매-2%소간우RNA
目的 探讨靶向基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的RNA干扰对人胰腺癌细胞粘附和侵袭的作用.方法 设计和构建靶向MMP-2的特异性小干扰RNA(siRNA)表达质粒, 将质粒转染入人胰腺癌BxPC-3细胞系中,根据转染质粒靶序列的不同分为5组,即pGPU6-1、 pGPU6-2、 pGPU6-3、pGPU6-4和阴性对照组pGPU6(-),并设仅加入转染剂的空白对照组.应用RT-PCR和Western blot法检测各组BxPC-3细胞转染后MMP-2蛋白及mRNA表达水平,应用MTT法及流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡水平,以平板粘附模型和Transwell小室模型检测各组转染后肿瘤细胞粘附和侵袭能力,比较各组间差异.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,pGPU6-1、pGPU6-2、pGPU6-3 组MMP-2 mRNA 抑制率分别为75.3%、 64.5%、51.6%和74.7%、63.7%、50.5%,差异均有统计学意义;MMP-2蛋白表达抑制率分别为79.1%、64%、52.3%和78%、62.2%、50.5%,差异均有统计学意义;粘附抑制率分别为63.1%、42.9%、25.6%和62.2%、41.6%、23.9%,且穿膜细胞数量明显降低,差异均有统计学意义.对照组与pGPU6-4组的MMP-2蛋白及mRNA表达水平无明显差异,在肿瘤细胞粘附和侵袭能力方面也未见明显差异.MTT法及流式细胞术的结果并没有提示各组间肿瘤细胞增殖和凋亡水平的差异.结论 靶向MMP-2的RNA干扰能够明显抑制胰腺癌BxPC-3细胞蛋白水平及mRNA水平的表达,从而抑制肿瘤细胞粘附和侵袭的能力,但并没有导致干扰后肿瘤细胞增殖和凋亡能力的改变.
目的 探討靶嚮基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)的RNA榦擾對人胰腺癌細胞粘附和侵襲的作用.方法 設計和構建靶嚮MMP-2的特異性小榦擾RNA(siRNA)錶達質粒, 將質粒轉染入人胰腺癌BxPC-3細胞繫中,根據轉染質粒靶序列的不同分為5組,即pGPU6-1、 pGPU6-2、 pGPU6-3、pGPU6-4和陰性對照組pGPU6(-),併設僅加入轉染劑的空白對照組.應用RT-PCR和Western blot法檢測各組BxPC-3細胞轉染後MMP-2蛋白及mRNA錶達水平,應用MTT法及流式細胞術檢測各組細胞增殖和凋亡水平,以平闆粘附模型和Transwell小室模型檢測各組轉染後腫瘤細胞粘附和侵襲能力,比較各組間差異.結果 與空白對照組和陰性對照組相比,pGPU6-1、pGPU6-2、pGPU6-3 組MMP-2 mRNA 抑製率分彆為75.3%、 64.5%、51.6%和74.7%、63.7%、50.5%,差異均有統計學意義;MMP-2蛋白錶達抑製率分彆為79.1%、64%、52.3%和78%、62.2%、50.5%,差異均有統計學意義;粘附抑製率分彆為63.1%、42.9%、25.6%和62.2%、41.6%、23.9%,且穿膜細胞數量明顯降低,差異均有統計學意義.對照組與pGPU6-4組的MMP-2蛋白及mRNA錶達水平無明顯差異,在腫瘤細胞粘附和侵襲能力方麵也未見明顯差異.MTT法及流式細胞術的結果併沒有提示各組間腫瘤細胞增殖和凋亡水平的差異.結論 靶嚮MMP-2的RNA榦擾能夠明顯抑製胰腺癌BxPC-3細胞蛋白水平及mRNA水平的錶達,從而抑製腫瘤細胞粘附和侵襲的能力,但併沒有導緻榦擾後腫瘤細胞增殖和凋亡能力的改變.
목적 탐토파향기질금속단백매-2(MMP-2)적RNA간우대인이선암세포점부화침습적작용.방법 설계화구건파향MMP-2적특이성소간우RNA(siRNA)표체질립, 장질립전염입인이선암BxPC-3세포계중,근거전염질립파서렬적불동분위5조,즉pGPU6-1、 pGPU6-2、 pGPU6-3、pGPU6-4화음성대조조pGPU6(-),병설부가입전염제적공백대조조.응용RT-PCR화Western blot법검측각조BxPC-3세포전염후MMP-2단백급mRNA표체수평,응용MTT법급류식세포술검측각조세포증식화조망수평,이평판점부모형화Transwell소실모형검측각조전염후종류세포점부화침습능력,비교각조간차이.결과 여공백대조조화음성대조조상비,pGPU6-1、pGPU6-2、pGPU6-3 조MMP-2 mRNA 억제솔분별위75.3%、 64.5%、51.6%화74.7%、63.7%、50.5%,차이균유통계학의의;MMP-2단백표체억제솔분별위79.1%、64%、52.3%화78%、62.2%、50.5%,차이균유통계학의의;점부억제솔분별위63.1%、42.9%、25.6%화62.2%、41.6%、23.9%,차천막세포수량명현강저,차이균유통계학의의.대조조여pGPU6-4조적MMP-2단백급mRNA표체수평무명현차이,재종류세포점부화침습능력방면야미견명현차이.MTT법급류식세포술적결과병몰유제시각조간종류세포증식화조망수평적차이.결론 파향MMP-2적RNA간우능구명현억제이선암BxPC-3세포단백수평급mRNA수평적표체,종이억제종류세포점부화침습적능력,단병몰유도치간우후종류세포증식화조망능력적개변.
