CAJ | 학술논문

目的:观察不同浓度的维生素C(VitC)对体外培养的骨骼肌成肌细胞(C2C12)增殖、凋亡的影响.方法:取体外培养的C2C12细胞,胰酶消化后制成单细胞悬液,离心重悬,调整细胞密度,按200 μL/孔接种,常规培养,待细胞融合率达80%且未出现细胞分化时,将细胞分6组:阴性对照组(C2C12 细胞中加入单纯无血清培养基)、H2O2组(C2C12 细胞中加入含500 μmol/L H2O2的无血清培养基)和VitC 1,2,3,4组(C2C12 细胞中加入含500 μmol/L H2O2的无血清培养基的基础上,分别加入不同浓度的VitC:10,20,60,100 mg/L).分别在干预0,6,24,36,48,72 h后采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测各组C2C12细胞的增殖.在干预36 h后采用Annexin V-PI双染法检测各组C2C12细胞凋亡率.结果:在干预36和72 h时,各浓度的VitC组的吸光度(OD)值均较H2O2组显著升高(P＜0.001),其中以VitC 4组升高最为显著,而且VitC 4组在干预36 h时的吸光度值高于阴性对照组(P＜0.05);在干预36 h时,VitC 2,3和4组的C2C12成肌细胞凋亡率明显低于H2O2组;VitC 2和3组的C2C12成肌细胞凋亡率高于阴性对照组,而VitC 4组的C2C12成肌细胞凋亡率明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:VitC能够有效抑制H2O2诱导的C2C12成肌细胞的凋亡,高浓度的VitC可能在干预36 h时对C2C12成肌细胞有促增殖的作用.
목적:관찰불동농도적유생소C(VitC)대체외배양적골격기성기세포(C2C12)증식、조망적영향.방법:취체외배양적C2C12세포,이매소화후제성단세포현액,리심중현,조정세포밀도,안200 μL/공접충,상규배양,대세포융합솔체80%차미출현세포분화시,장세포분6조:음성대조조(C2C12 세포중가입단순무혈청배양기)、H2O2조(C2C12 세포중가입함500 μmol/L H2O2적무혈청배양기)화VitC 1,2,3,4조(C2C12 세포중가입함500 μmol/L H2O2적무혈청배양기적기출상,분별가입불동농도적VitC:10,20,60,100 mg/L).분별재간예0,6,24,36,48,72 h후채용사갑기우담서염법(MTT)검측각조C2C12세포적증식.재간예36 h후채용Annexin V-PI쌍염법검측각조C2C12세포조망솔.결과:재간예36화72 h시,각농도적VitC조적흡광도(OD)치균교H2O2조현저승고(P＜0.001),기중이VitC 4조승고최위현저,이차VitC 4조재간예36 h시적흡광도치고우음성대조조(P＜0.05);재간예36 h시,VitC 2,3화4조적C2C12성기세포조망솔명현저우H2O2조;VitC 2화3조적C2C12성기세포조망솔고우음성대조조,이VitC 4조적C2C12성기세포조망솔명현저우음성대조조,차이유통계학의의(P＜0.01).결론:VitC능구유효억제H2O2유도적C2C12성기세포적조망,고농도적VitC가능재간예36 h시대C2C12성기세포유촉증식적작용.