比较70%乙醇与中性甲醛固定对肺癌组织DNA质量影响的实验研究
비교70%을순여중성갑철고정대폐암조직DNA질량영향적실험연구
Experimental study on the quality comparison of DNA samples from lung cancer tissues fixed by 70% ethanol versus neutral formalin
  • 万方数据
    实用肿瘤学杂志 실용종류학잡지
    JOURNAL OF PRACTICAL ONCOLOGY
    2010年 3期 238-242 ,共5页

    谢至%陈志红%郭爱林%董嵩%陈世良%陈志勇%宗飒%唐红艳%严红虹%张绪超

    사지%진지홍%곽애림%동숭%진세량%진지용%종삽%당홍염%엄홍홍%장서초

    70％乙醇%甲醛%DNA提取%PCR%肺癌 70％乙醇%甲醛%DNA提取%PCR%肺癌
    70％을순%갑철%DNA제취%PCR%폐암
    目的 由于常规10%中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增.本研究比较70%乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响.方法 取70%乙醇固定的肺癌组织30例(其中10例固定7天以上),10%中性甲醛固定的自身配对癌组织30份.采用试剂盒提取DNA,分析条带完整性和纯度,并用PCR扩增HBB(beta globin)及SERPINA9(an-titrypsin)两基因的不同长度片段,用琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物.结果 70%乙醇固定组的基因组DNA经电泳条带整齐未见明显降解,而10%中性甲醛组DNA条带弥散,有可见降解.后续普通PCR扩增268 bp、536 bp的产物显示乙醇同定组产量明显高于10%中性甲醛固定组.实时荧光定量PCR也显示在扩增123 bp、251 bp、346 bp三个不同长度片段时乙醇同定组产量均明显高于10%中性甲醛固定组(P<0.01).中性甲醛组DNA在扩增346 bp长度片段时成功率下降至47%(14/30).乙醇固定时间长短对DNA的antitrypsin模板质量无明显差异.结论 70%乙醇固定法对肺癌组织DNA保存效果优于中性甲醛法,且更适合长片段DNA扩增.长时间乙醇固定法对DNA质量无明显影响,可适合于长途运输生物标本.
    목적 유우상규10%중성갑철고정적조직DNA제취질량교저,역발생단렬혹강해,불리우보존급장편단DNA확증.본연구비교70%을순여중성갑철고정법대DNA질량급후속PCR적영향.방법 취70%을순고정적폐암조직30례(기중10례고정7천이상),10%중성갑철고정적자신배대암조직30빈.채용시제합제취DNA,분석조대완정성화순도,병용PCR확증HBB(beta globin)급SERPINA9(an-titrypsin)량기인적불동장도편단,용경지당응효전영분석확증산물.결과 70%을순고정조적기인조DNA경전영조대정제미견명현강해,이10%중성갑철조DNA조대미산,유가견강해.후속보통PCR확증268 bp、536 bp적산물현시을순동정조산량명현고우10%중성갑철고정조.실시형광정량PCR야현시재확증123 bp、251 bp、346 bp삼개불동장도편단시을순동정조산량균명현고우10%중성갑철고정조(P<0.01).중성갑철조DNA재확증346 bp장도편단시성공솔하강지47%(14/30).을순고정시간장단대DNA적antitrypsin모판질량무명현차이.결론 70%을순고정법대폐암조직DNA보존효과우우중성갑철법,차경괄합장편단DNA확증.장시간을순고정법대DNA질량무명현영향,가괄합우장도운수생물표본.
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