生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2010年
6期
10-14
,共5页
黄仕杰%程抒劼%郭心悦%辛燕花%郭丽琼%林俊芳
黃仕傑%程抒劼%郭心悅%辛燕花%郭麗瓊%林俊芳
황사걸%정서할%곽심열%신연화%곽려경%림준방
南方红豆杉%紫杉烷%13α-羟化酶%基因克隆%序列分析
南方紅豆杉%紫杉烷%13α-羥化酶%基因剋隆%序列分析
남방홍두삼%자삼완%13α-간화매%기인극륭%서렬분석
目的:紫杉烷13α-羟化酶是紫杉醇下游合成途径关键酶之一,负责催化紫杉二烯-5α-醇的C13侧链发生羟基化反应生成紫杉二烯-5α、13α-二醇.该研究从南方红豆杉中克隆出紫杉烷13α-羟化酶基因并对其序列进行生物信息学分析.方法:利用南方红豆杉的总DNA和总RNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术克隆出紫杉烷13α-羟化酶基因的DNA序列和cDNA序列,利用swiss-prot、DNAMAN等生物信息学工具对其核酸序列和蛋白序列进行分析.结果:测序结果显示其cDNA序列长度为1 651bp,含有一个1 458bp的开放阅读框,同源性比较分析结果表明,其氨基酸序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的紫杉烷13α-羟化酶氨基酸序列的一致性为96%.结论:成功克隆出南方红豆杉紫杉烷13α-羟化酶基因,为利用合成生物学工程技术生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础.
目的:紫杉烷13α-羥化酶是紫杉醇下遊閤成途徑關鍵酶之一,負責催化紫杉二烯-5α-醇的C13側鏈髮生羥基化反應生成紫杉二烯-5α、13α-二醇.該研究從南方紅豆杉中剋隆齣紫杉烷13α-羥化酶基因併對其序列進行生物信息學分析.方法:利用南方紅豆杉的總DNA和總RNA為模闆,採用PCR和RT-PCR技術剋隆齣紫杉烷13α-羥化酶基因的DNA序列和cDNA序列,利用swiss-prot、DNAMAN等生物信息學工具對其覈痠序列和蛋白序列進行分析.結果:測序結果顯示其cDNA序列長度為1 651bp,含有一箇1 458bp的開放閱讀框,同源性比較分析結果錶明,其氨基痠序列與已經報道的蔓地亞紅豆杉的紫杉烷13α-羥化酶氨基痠序列的一緻性為96%.結論:成功剋隆齣南方紅豆杉紫杉烷13α-羥化酶基因,為利用閤成生物學工程技術生產紫杉醇或其前體物質提供瞭分子基礎.
목적:자삼완13α-간화매시자삼순하유합성도경관건매지일,부책최화자삼이희-5α-순적C13측련발생간기화반응생성자삼이희-5α、13α-이순.해연구종남방홍두삼중극륭출자삼완13α-간화매기인병대기서렬진행생물신식학분석.방법:이용남방홍두삼적총DNA화총RNA위모판,채용PCR화RT-PCR기술극륭출자삼완13α-간화매기인적DNA서렬화cDNA서렬,이용swiss-prot、DNAMAN등생물신식학공구대기핵산서렬화단백서렬진행분석.결과:측서결과현시기cDNA서렬장도위1 651bp,함유일개1 458bp적개방열독광,동원성비교분석결과표명,기안기산서렬여이경보도적만지아홍두삼적자삼완13α-간화매안기산서렬적일치성위96%.결론:성공극륭출남방홍두삼자삼완13α-간화매기인,위이용합성생물학공정기술생산자삼순혹기전체물질제공료분자기출.