大连海洋大学学报
大連海洋大學學報
대련해양대학학보
JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY
2012年
2期
150-157
,共8页
田照辉%徐绍刚%王巍%胡红霞%董颖%宋超
田照輝%徐紹剛%王巍%鬍紅霞%董穎%宋超
전조휘%서소강%왕외%호홍하%동영%송초
西伯利亚鲟%HSP70 cDNA%序列分析%组织分布
西伯利亞鱘%HSP70 cDNA%序列分析%組織分佈
서백리아심%HSP70 cDNA%서렬분석%조직분포
采用普通PCR和RACE技术克隆了西伯利亚鲟Acipenser baerii热休克蛋白HSP70 cDNA的全序列,该序列全长为2343 bp,其中5'非编码区为140 bp,3'非编码区为256 bp,可读编码框(ORF)为1947bp,编码为648个氨基酸.该氨基酸序列中含有HSP70家族的3个特征序列——IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL和ⅣLVGGSTRIPKIQK,细胞质特征性保守序列为EEVD,C端重复序列为GGMP.该cDNA序列与其它生物的HSP70 cDNA序列一样具有很高的相似性.系统发育树显示,西伯利亚鲟与非洲爪蛙蟾Xenopus laevis、密西西比短吻鳄Alligator mississippiensis、美西螈Ambystoma mexicanum的亲缘关系较近.实时定量分析结果表明,水温为17.5℃时,西伯利亚鲟肝脏、鳃、脾脏、心脏、肌肉、中肠、性腺、脑8种组织中均有HSP70表达,其中HSP70在脾脏中的表达量最高,鳃中的次之,肝脏中最低(P＜0.05).
採用普通PCR和RACE技術剋隆瞭西伯利亞鱘Acipenser baerii熱休剋蛋白HSP70 cDNA的全序列,該序列全長為2343 bp,其中5'非編碼區為140 bp,3'非編碼區為256 bp,可讀編碼框(ORF)為1947bp,編碼為648箇氨基痠.該氨基痠序列中含有HSP70傢族的3箇特徵序列——IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL和ⅣLVGGSTRIPKIQK,細胞質特徵性保守序列為EEVD,C耑重複序列為GGMP.該cDNA序列與其它生物的HSP70 cDNA序列一樣具有很高的相似性.繫統髮育樹顯示,西伯利亞鱘與非洲爪蛙蟾Xenopus laevis、密西西比短吻鱷Alligator mississippiensis、美西螈Ambystoma mexicanum的親緣關繫較近.實時定量分析結果錶明,水溫為17.5℃時,西伯利亞鱘肝髒、鰓、脾髒、心髒、肌肉、中腸、性腺、腦8種組織中均有HSP70錶達,其中HSP70在脾髒中的錶達量最高,鰓中的次之,肝髒中最低(P＜0.05).
채용보통PCR화RACE기술극륭료서백리아심Acipenser baerii열휴극단백HSP70 cDNA적전서렬,해서렬전장위2343 bp,기중5'비편마구위140 bp,3'비편마구위256 bp,가독편마광(ORF)위1947bp,편마위648개안기산.해안기산서렬중함유HSP70가족적3개특정서렬——IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL화ⅣLVGGSTRIPKIQK,세포질특정성보수서렬위EEVD,C단중복서렬위GGMP.해cDNA서렬여기타생물적HSP70 cDNA서렬일양구유흔고적상사성.계통발육수현시,서백리아심여비주조와섬Xenopus laevis、밀서서비단문악Alligator mississippiensis、미서원Ambystoma mexicanum적친연관계교근.실시정량분석결과표명,수온위17.5℃시,서백리아심간장、새、비장、심장、기육、중장、성선、뇌8충조직중균유HSP70표체,기중HSP70재비장중적표체량최고,새중적차지,간장중최저(P＜0.05).
