世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2003年
10期
1515-1519
,共5页
阚全程%余祖江%雷延昌%杨东亮%郝连杰
闞全程%餘祖江%雷延昌%楊東亮%郝連傑
감전정%여조강%뢰연창%양동량%학련걸
目的:建立清除乙型肝炎病毒(HBV)自杀基因平衡制约载体系统,靶向清除HBV感染的肝细胞,抑制慢性乙型肝炎和肝硬化患者免疫再活动.方法:逆转录PCR(RT-PCR)扩增丙型肝炎病毒(HCV)基因组中核糖体插入位点(IRES),以pcDNA3载体为基础,构建双顺反子表达载体.同时在IRES位点的上游克隆HBV表面基因的部分反义序列和HCV全长核心基因,在IRES位点下游克隆胸腺苷激酶基因,PCR、酶切和测序鉴定.构建的清除乙型肝炎病毒(HBV)自杀基因平衡制约载体系统分别转染培养基含有更昔洛韦的HepG2细胞和2.2.15细胞.结果:构建的清除乙型肝炎病毒(HBV)自杀基因平衡制约载体系统可以选择性促使2.215细胞凋亡(实验组细胞凋亡率为15%,而对照组仅为6%);抑制2.2.15细胞在培养基中分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),统计学分析表明,HBsAg在培养基中检测滴度,在两组之间有显著性差异(P＜0.05).结论:构建以HBV表面基因为靶基因,自杀基因为效应基因的自杀基因制约平衡系统,可能为下一步慢性乙型肝炎的基因治疗提供理想的基因治疗载体.
目的:建立清除乙型肝炎病毒(HBV)自殺基因平衡製約載體繫統,靶嚮清除HBV感染的肝細胞,抑製慢性乙型肝炎和肝硬化患者免疫再活動.方法:逆轉錄PCR(RT-PCR)擴增丙型肝炎病毒(HCV)基因組中覈糖體插入位點(IRES),以pcDNA3載體為基礎,構建雙順反子錶達載體.同時在IRES位點的上遊剋隆HBV錶麵基因的部分反義序列和HCV全長覈心基因,在IRES位點下遊剋隆胸腺苷激酶基因,PCR、酶切和測序鑒定.構建的清除乙型肝炎病毒(HBV)自殺基因平衡製約載體繫統分彆轉染培養基含有更昔洛韋的HepG2細胞和2.2.15細胞.結果:構建的清除乙型肝炎病毒(HBV)自殺基因平衡製約載體繫統可以選擇性促使2.215細胞凋亡(實驗組細胞凋亡率為15%,而對照組僅為6%);抑製2.2.15細胞在培養基中分泌乙型肝炎病毒錶麵抗原(HBsAg),統計學分析錶明,HBsAg在培養基中檢測滴度,在兩組之間有顯著性差異(P＜0.05).結論:構建以HBV錶麵基因為靶基因,自殺基因為效應基因的自殺基因製約平衡繫統,可能為下一步慢性乙型肝炎的基因治療提供理想的基因治療載體.
목적:건립청제을형간염병독(HBV)자살기인평형제약재체계통,파향청제HBV감염적간세포,억제만성을형간염화간경화환자면역재활동.방법:역전록PCR(RT-PCR)확증병형간염병독(HCV)기인조중핵당체삽입위점(IRES),이pcDNA3재체위기출,구건쌍순반자표체재체.동시재IRES위점적상유극륭HBV표면기인적부분반의서렬화HCV전장핵심기인,재IRES위점하유극륭흉선감격매기인,PCR、매절화측서감정.구건적청제을형간염병독(HBV)자살기인평형제약재체계통분별전염배양기함유경석락위적HepG2세포화2.2.15세포.결과:구건적청제을형간염병독(HBV)자살기인평형제약재체계통가이선택성촉사2.215세포조망(실험조세포조망솔위15%,이대조조부위6%);억제2.2.15세포재배양기중분비을형간염병독표면항원(HBsAg),통계학분석표명,HBsAg재배양기중검측적도,재량조지간유현저성차이(P＜0.05).결론:구건이HBV표면기인위파기인,자살기인위효응기인적자살기인제약평형계통,가능위하일보만성을형간염적기인치료제공이상적기인치료재체.
