昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2004年
3期
310-315
,共6页
江琰%刘克武%雷远成%宋贤丽
江琰%劉剋武%雷遠成%宋賢麗
강염%류극무%뢰원성%송현려
意蜂工蜂%酸性磷酸酶%分离纯化%性质
意蜂工蜂%痠性燐痠酶%分離純化%性質
의봉공봉%산성린산매%분리순화%성질
从意蜂Apis mellifera工蜂体内分离提纯酸性磷酸酶(ACPase,EC3.1.3.2),并对其性质进行了研究.将工蜂酸性磷酸酶的初提物经分段盐析、DEAE-Sepharose FF离子交换层析及Sephdex G-200凝胶过滤等纯化步骤,得到经聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白区带的酶液.提纯倍数为77.24,酶液比活力为16.22 U/mg(对硝基苯磷酸二钠作底物).利用凝胶过滤法测定酶的相对分子质量为135 kD,SDS-PAGE测定酶的亚基相对分子质量为63.1 kD.酶的等电点为4.46和4.79.非还原/还原(NR/R)单向、双向SDS-PAGE显示酶分子含有链内二硫键.对二级结构圆二色谱分析显示,酶分子中α-螺旋占13.84%,β-折叠占25.68%,无规则卷曲占56.34%.氨基酸组成分析结果表明,酸性磷酸酶约含有507个氨基酸残基,富含门冬氨酸残基.
從意蜂Apis mellifera工蜂體內分離提純痠性燐痠酶(ACPase,EC3.1.3.2),併對其性質進行瞭研究.將工蜂痠性燐痠酶的初提物經分段鹽析、DEAE-Sepharose FF離子交換層析及Sephdex G-200凝膠過濾等純化步驟,得到經聚丙烯酰胺凝膠電泳為單一蛋白區帶的酶液.提純倍數為77.24,酶液比活力為16.22 U/mg(對硝基苯燐痠二鈉作底物).利用凝膠過濾法測定酶的相對分子質量為135 kD,SDS-PAGE測定酶的亞基相對分子質量為63.1 kD.酶的等電點為4.46和4.79.非還原/還原(NR/R)單嚮、雙嚮SDS-PAGE顯示酶分子含有鏈內二硫鍵.對二級結構圓二色譜分析顯示,酶分子中α-螺鏇佔13.84%,β-摺疊佔25.68%,無規則捲麯佔56.34%.氨基痠組成分析結果錶明,痠性燐痠酶約含有507箇氨基痠殘基,富含門鼕氨痠殘基.
종의봉Apis mellifera공봉체내분리제순산성린산매(ACPase,EC3.1.3.2),병대기성질진행료연구.장공봉산성린산매적초제물경분단염석、DEAE-Sepharose FF리자교환층석급Sephdex G-200응효과려등순화보취,득도경취병희선알응효전영위단일단백구대적매액.제순배수위77.24,매액비활력위16.22 U/mg(대초기분린산이납작저물).이용응효과려법측정매적상대분자질량위135 kD,SDS-PAGE측정매적아기상대분자질량위63.1 kD.매적등전점위4.46화4.79.비환원/환원(NR/R)단향、쌍향SDS-PAGE현시매분자함유련내이류건.대이급결구원이색보분석현시,매분자중α-라선점13.84%,β-절첩점25.68%,무규칙권곡점56.34%.안기산조성분석결과표명,산성린산매약함유507개안기산잔기,부함문동안산잔기.
