第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2005年
12期
1187-1189
,共3页
李成仁%蔡文琴%苏炳银%张成岗
李成仁%蔡文琴%囌炳銀%張成崗
리성인%채문금%소병은%장성강
NOV基因%RT-PCR%基因克隆
NOV基因%RT-PCR%基因剋隆
NOV기인%RT-PCR%기인극륭
目的获得NOV基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达.方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1 165 bp的NOV基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ质粒中,用脂质体法将载体转染入COS-7细胞中,用Western blot和免疫细胞化学方法检测其表达情况.结果 NOV基因cDNA已经正确克隆到真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ质粒中;体外转染入COS-7细胞中后,可见转染细胞有NOV蛋白的表达.结论本实验所构建的重组质粒为NOV基因的作用研究提供了有利的分子工具.
目的穫得NOV基因真覈錶達載體併檢測其在細胞中的錶達.方法利用逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)方法,從新鮮大鼠大腦組織的總cDNA中擴增齣1 165 bp的NOV基因的cDNA編碼區序列,然後用HindⅢ和BamHⅠ雙酶切後定嚮剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ質粒中,用脂質體法將載體轉染入COS-7細胞中,用Western blot和免疫細胞化學方法檢測其錶達情況.結果 NOV基因cDNA已經正確剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ質粒中;體外轉染入COS-7細胞中後,可見轉染細胞有NOV蛋白的錶達.結論本實驗所構建的重組質粒為NOV基因的作用研究提供瞭有利的分子工具.
목적획득NOV기인진핵표체재체병검측기재세포중적표체.방법이용역전록-다취매련반응(RT-PCR)방법,종신선대서대뇌조직적총cDNA중확증출1 165 bp적NOV기인적cDNA편마구서렬,연후용HindⅢ화BamHⅠ쌍매절후정향극륭입진핵표체재체pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ질립중,용지질체법장재체전염입COS-7세포중,용Western blot화면역세포화학방법검측기표체정황.결과 NOV기인cDNA이경정학극륭도진핵표체재체pcDNA3.1/Myc-His(+)/lacZ질립중;체외전염입COS-7세포중후,가견전염세포유NOV단백적표체.결론본실험소구건적중조질립위NOV기인적작용연구제공료유리적분자공구.
