东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
1期
22-27
,共6页
郭庆勋%秦智伟%丁国华%李景鹏
郭慶勛%秦智偉%丁國華%李景鵬
곽경훈%진지위%정국화%리경붕
薄皮甜瓜%ACC合成酶基因%反义基因%反义表达载体
薄皮甜瓜%ACC閤成酶基因%反義基因%反義錶達載體
박피첨과%ACC합성매기인%반의기인%반의표체재체
从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy.测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与GenBank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthse,ACS)基因比对,核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性为98%.克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pCAM2301的E8启动子和NOS终止子之间,构建成E8调控下ACS基因反义表达载体.通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统.
從成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉組織中分離總RNA,經RT-PCR擴增得到0.7kb的cDNA片段,將其剋隆到質粒載體pGEM-T Easy.測序錶明,該基因為777 bp,編碼258箇氨基痠,與GenBank中甜瓜1-氨基環丙烷-1-羧痠閤成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthse,ACS)基因比對,覈苷痠同源性為99%,氨基痠同源性為98%.剋隆片段經雙酶切消化,反嚮插入到植物錶達載體pCAM2301的E8啟動子和NOS終止子之間,構建成E8調控下ACS基因反義錶達載體.通過凍融法將攜帶反義cDNA的植物錶達載體質粒轉入根癌農桿菌LBA4404,得到瞭完整的Ti質粒錶達載體繫統.
종성숙적박피첨과(Cucumis melo cv.Qitian I)과육조직중분리총RNA,경RT-PCR확증득도0.7kb적cDNA편단,장기극륭도질립재체pGEM-T Easy.측서표명,해기인위777 bp,편마258개안기산,여GenBank중첨과1-안기배병완-1-최산합성매(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthse,ACS)기인비대,핵감산동원성위99%,안기산동원성위98%.극륭편단경쌍매절소화,반향삽입도식물표체재체pCAM2301적E8계동자화NOS종지자지간,구건성E8조공하ACS기인반의표체재체.통과동융법장휴대반의cDNA적식물표체재체질립전입근암농간균LBA4404,득도료완정적Ti질립표체재체계통.
