复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
3期
431-433,448
,共4页
王单松%靳大勇%吴肇汉%邹卫国%许德华%郑仲承%刘新垣
王單鬆%靳大勇%吳肇漢%鄒衛國%許德華%鄭仲承%劉新垣
왕단송%근대용%오조한%추위국%허덕화%정중승%류신원
人白细胞介素10%脂质体%重组质粒
人白細胞介素10%脂質體%重組質粒
인백세포개소10%지질체%중조질립
目的 研究人白细胞介素10(hIL-10)cDNA重组质粒的转染和表达,为以后的基因治疗研究奠定基础.方法 构建hIL-10 cDNA真核表达重组质粒pcDNA3-hIL-10后进行酶切和测序鉴定.以SA脂质体介导对照质粒pcDNA3及重组质粒pcDNA3-hIL-10转染COS7细胞和SD大鼠,用ELISA方法检测COS7细胞培养液及大鼠胰腺、肺和肝脏组织中hIL-10的含量.结果 用pcDNA3-hIL-10质粒转染COS7细胞48 h后,在培养液中检测到hIL-10蛋白浓度为38 000 pg/mL,而对照组仅为55 pg/mL.hIL-10基因转染24 h后大鼠胰腺、肺和肝脏组织hIL-10的产生量达到峰值,以后逐渐下降,至96 h仍显著高于对照组(P＜0.05),1周后降至正常水平.结论 本研究构建的pcDNA3-hIL-10重组质粒可以在真核细胞及大鼠体内高效表达.
目的 研究人白細胞介素10(hIL-10)cDNA重組質粒的轉染和錶達,為以後的基因治療研究奠定基礎.方法 構建hIL-10 cDNA真覈錶達重組質粒pcDNA3-hIL-10後進行酶切和測序鑒定.以SA脂質體介導對照質粒pcDNA3及重組質粒pcDNA3-hIL-10轉染COS7細胞和SD大鼠,用ELISA方法檢測COS7細胞培養液及大鼠胰腺、肺和肝髒組織中hIL-10的含量.結果 用pcDNA3-hIL-10質粒轉染COS7細胞48 h後,在培養液中檢測到hIL-10蛋白濃度為38 000 pg/mL,而對照組僅為55 pg/mL.hIL-10基因轉染24 h後大鼠胰腺、肺和肝髒組織hIL-10的產生量達到峰值,以後逐漸下降,至96 h仍顯著高于對照組(P＜0.05),1週後降至正常水平.結論 本研究構建的pcDNA3-hIL-10重組質粒可以在真覈細胞及大鼠體內高效錶達.
목적 연구인백세포개소10(hIL-10)cDNA중조질립적전염화표체,위이후적기인치료연구전정기출.방법 구건hIL-10 cDNA진핵표체중조질립pcDNA3-hIL-10후진행매절화측서감정.이SA지질체개도대조질립pcDNA3급중조질립pcDNA3-hIL-10전염COS7세포화SD대서,용ELISA방법검측COS7세포배양액급대서이선、폐화간장조직중hIL-10적함량.결과 용pcDNA3-hIL-10질립전염COS7세포48 h후,재배양액중검측도hIL-10단백농도위38 000 pg/mL,이대조조부위55 pg/mL.hIL-10기인전염24 h후대서이선、폐화간장조직hIL-10적산생량체도봉치,이후축점하강,지96 h잉현저고우대조조(P＜0.05),1주후강지정상수평.결론 본연구구건적pcDNA3-hIL-10중조질립가이재진핵세포급대서체내고효표체.
