中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
6期
540-544
,共5页
姚航%岳隧岩%金跃明%潘碧峰%高峰%崔大祥
姚航%嶽隧巖%金躍明%潘碧峰%高峰%崔大祥
요항%악수암%금약명%반벽봉%고봉%최대상
聚酰胺树形分子高聚合物%反义寡核苷酸%survivin基因%肝癌%凋亡
聚酰胺樹形分子高聚閤物%反義寡覈苷痠%survivin基因%肝癌%凋亡
취선알수형분자고취합물%반의과핵감산%survivin기인%간암%조망
目的:研究聚酰胺(polyamidoamine ,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法:将200 μg/L survivin-asODN和3.66 μg/L PAMAM混合制备PAMAM反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照.透射电镜观察复合物的形态、粒径,Zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度.将上述两种基因载体复合物转染肝癌SMMC-7721细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后肿瘤细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率.结果:成功制备PAMAM反义基因载体系统PAMAM-survivin-asODN.该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.60 )vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta电位高于后者[(37.7±3.80 )vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];两者基因载药率、包封率无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-asODN 转染肝癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05).转染后肝癌细胞siurvivin蛋白的表达显著低于脂质体复合物[(26.80±5.65)vs(36.96±5.89),P<0.05],该细胞的凋亡率显著高于脂质体复合物转染细胞[(60.3±8.25)% vs(48.7±9.39)%,P<0.05].结论:PAMAM作为载体系统能将survivin-asODN高效递送到肝癌SMMC-7221细胞,诱导人肝癌细胞的凋亡.
目的:研究聚酰胺(polyamidoamine ,PAMAM)樹形分子高聚閤物作為survivin反義寡覈苷痠(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)載體傳遞繫統的可行性以及對肝癌SMMC-7721細胞凋亡的影響.方法:將200 μg/L survivin-asODN和3.66 μg/L PAMAM混閤製備PAMAM反義基因複閤物,同時製備暘離子脂質體反義基因複閤物作為對照.透射電鏡觀察複閤物的形態、粒徑,Zeta電位分析儀測定複閤物的zeta電位,離心法和紫外分光光度儀測定複閤物的包封率、載藥率和體外DNA釋放速度.將上述兩種基因載體複閤物轉染肝癌SMMC-7721細胞,測定其轉染效率;Western blotting檢測轉染後腫瘤細胞中survivin蛋白的錶達;流式細胞術檢測腫瘤細胞的凋亡率.結果:成功製備PAMAM反義基因載體繫統PAMAM-survivin-asODN.該複閤物的粒徑小于脂質體-survivin-asODN複閤物的粒徑[(64.9±9.60 )vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta電位高于後者[(37.7±3.80 )vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];兩者基因載藥率、包封率無顯著差異;PAMAM反義基因複閤物對DNA持續釋放達14 d,但脂質體複閤物隻持續5 d.PAMAM-survivin-asODN 轉染肝癌細胞的效果彊于脂質體-survivin-asODN(P<0.05).轉染後肝癌細胞siurvivin蛋白的錶達顯著低于脂質體複閤物[(26.80±5.65)vs(36.96±5.89),P<0.05],該細胞的凋亡率顯著高于脂質體複閤物轉染細胞[(60.3±8.25)% vs(48.7±9.39)%,P<0.05].結論:PAMAM作為載體繫統能將survivin-asODN高效遞送到肝癌SMMC-7221細胞,誘導人肝癌細胞的凋亡.
목적:연구취선알(polyamidoamine ,PAMAM)수형분자고취합물작위survivin반의과핵감산(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)재체전체계통적가행성이급대간암SMMC-7721세포조망적영향.방법:장200 μg/L survivin-asODN화3.66 μg/L PAMAM혼합제비PAMAM반의기인복합물,동시제비양리자지질체반의기인복합물작위대조.투사전경관찰복합물적형태、립경,Zeta전위분석의측정복합물적zeta전위,리심법화자외분광광도의측정복합물적포봉솔、재약솔화체외DNA석방속도.장상술량충기인재체복합물전염간암SMMC-7721세포,측정기전염효솔;Western blotting검측전염후종류세포중survivin단백적표체;류식세포술검측종류세포적조망솔.결과:성공제비PAMAM반의기인재체계통PAMAM-survivin-asODN.해복합물적립경소우지질체-survivin-asODN복합물적립경[(64.9±9.60 )vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],단zeta전위고우후자[(37.7±3.80 )vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];량자기인재약솔、포봉솔무현저차이;PAMAM반의기인복합물대DNA지속석방체14 d,단지질체복합물지지속5 d.PAMAM-survivin-asODN 전염간암세포적효과강우지질체-survivin-asODN(P<0.05).전염후간암세포siurvivin단백적표체현저저우지질체복합물[(26.80±5.65)vs(36.96±5.89),P<0.05],해세포적조망솔현저고우지질체복합물전염세포[(60.3±8.25)% vs(48.7±9.39)%,P<0.05].결론:PAMAM작위재체계통능장survivin-asODN고효체송도간암SMMC-7221세포,유도인간암세포적조망.