分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2010年
8期
1133-1138
,共6页
汪毅%毛红菊%臧国庆%张宏莲%金庆辉%赵建龙
汪毅%毛紅菊%臧國慶%張宏蓮%金慶輝%趙建龍
왕의%모홍국%장국경%장굉련%금경휘%조건룡
乙肝病毒DNA%纳米金探针%生物条形码扩增%纳米探针芯片
乙肝病毒DNA%納米金探針%生物條形碼擴增%納米探針芯片
을간병독DNA%납미금탐침%생물조형마확증%납미탐침심편
利用两组探针修饰的微粒:(1)表面标记有可与待测乙肝病毒(HBV) DNA另一端结合的纳米金探针1(信号探针)以及可与信号探针部分结合的纳米金探针2(检测探针);(2)表面标记有可与待测HBV DNA一端结合的磁珠探针(捕捉探针1).检测靶HBV DNA时,磁珠探针与信号探针在液相中可分别与HBV DNA靶序列一端结合最终形成三明治样结构.再以磁场将三明治样复合物从反应液中分离,以DTT溶液将信号探针从纳米金颗粒上洗脱.洗脱后的信号探针数量反映靶基因的多寡,信号探针一段与预先点样的基因芯片上的捕捉探针2结合,检测探针与信号探针另一段相结合,最后用银染液将检测探针显色从而得到靶目标DNA相对定量信息.结果表明,本检测方法的检测灵敏度达到10-15 mol/L水平.检测时间少于1.5 h,检测结果与HBV DNA水平呈现较好的线性关系且无假阳性结果;本方法有望用于乙肝病人血清中HBV DNA的快速筛测及其它微生物基因的检测.
利用兩組探針脩飾的微粒:(1)錶麵標記有可與待測乙肝病毒(HBV) DNA另一耑結閤的納米金探針1(信號探針)以及可與信號探針部分結閤的納米金探針2(檢測探針);(2)錶麵標記有可與待測HBV DNA一耑結閤的磁珠探針(捕捉探針1).檢測靶HBV DNA時,磁珠探針與信號探針在液相中可分彆與HBV DNA靶序列一耑結閤最終形成三明治樣結構.再以磁場將三明治樣複閤物從反應液中分離,以DTT溶液將信號探針從納米金顆粒上洗脫.洗脫後的信號探針數量反映靶基因的多寡,信號探針一段與預先點樣的基因芯片上的捕捉探針2結閤,檢測探針與信號探針另一段相結閤,最後用銀染液將檢測探針顯色從而得到靶目標DNA相對定量信息.結果錶明,本檢測方法的檢測靈敏度達到10-15 mol/L水平.檢測時間少于1.5 h,檢測結果與HBV DNA水平呈現較好的線性關繫且無假暘性結果;本方法有望用于乙肝病人血清中HBV DNA的快速篩測及其它微生物基因的檢測.
이용량조탐침수식적미립:(1)표면표기유가여대측을간병독(HBV) DNA령일단결합적납미금탐침1(신호탐침)이급가여신호탐침부분결합적납미금탐침2(검측탐침);(2)표면표기유가여대측HBV DNA일단결합적자주탐침(포착탐침1).검측파HBV DNA시,자주탐침여신호탐침재액상중가분별여HBV DNA파서렬일단결합최종형성삼명치양결구.재이자장장삼명치양복합물종반응액중분리,이DTT용액장신호탐침종납미금과립상세탈.세탈후적신호탐침수량반영파기인적다과,신호탐침일단여예선점양적기인심편상적포착탐침2결합,검측탐침여신호탐침령일단상결합,최후용은염액장검측탐침현색종이득도파목표DNA상대정량신식.결과표명,본검측방법적검측령민도체도10-15 mol/L수평.검측시간소우1.5 h,검측결과여HBV DNA수평정현교호적선성관계차무가양성결과;본방법유망용우을간병인혈청중HBV DNA적쾌속사측급기타미생물기인적검측.