中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
241-245
,共5页
潘小霞%张顺%袁静%文喻玲%陈元鼎
潘小霞%張順%袁靜%文喻玲%陳元鼎
반소하%장순%원정%문유령%진원정
胃肠炎%轮状病毒属%基因融合%绿色荧光蛋白质类%生物医学研究
胃腸炎%輪狀病毒屬%基因融閤%綠色熒光蛋白質類%生物醫學研究
위장염%륜상병독속%기인융합%록색형광단백질류%생물의학연구
目的 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与轮状病毒(RV)VP6基因融合表达载体,研究融合蛋白表达及在细胞中的分布.方法 提取A组人RV TB-Chen株VP6基因,用PCR扩增VP6编码cDNA片段.将此基因片段与真核表达载体pEGFP-C1携带的EGFP融合;运用脂质体的方法,将获得的重组质粒转染到MA104细胞中,在荧光显微镜下观察蛋白的表达及其在细胞中的分布情况.结果 成功构建了融合表达质粒；转染细胞后,融合蛋白可在MA104细胞中表达且主要分布在胞质中.结论 RV VP6可与EGFP融合表达,融合蛋白在细胞质中呈均匀的分布,与RV感染细胞中合成的VP6蛋白的分布有较大的差别.
目的 構建增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)與輪狀病毒(RV)VP6基因融閤錶達載體,研究融閤蛋白錶達及在細胞中的分佈.方法 提取A組人RV TB-Chen株VP6基因,用PCR擴增VP6編碼cDNA片段.將此基因片段與真覈錶達載體pEGFP-C1攜帶的EGFP融閤;運用脂質體的方法,將穫得的重組質粒轉染到MA104細胞中,在熒光顯微鏡下觀察蛋白的錶達及其在細胞中的分佈情況.結果 成功構建瞭融閤錶達質粒；轉染細胞後,融閤蛋白可在MA104細胞中錶達且主要分佈在胞質中.結論 RV VP6可與EGFP融閤錶達,融閤蛋白在細胞質中呈均勻的分佈,與RV感染細胞中閤成的VP6蛋白的分佈有較大的差彆.
목적 구건증강형록색형광단백(EGFP)여륜상병독(RV)VP6기인융합표체재체,연구융합단백표체급재세포중적분포.방법 제취A조인RV TB-Chen주VP6기인,용PCR확증VP6편마cDNA편단.장차기인편단여진핵표체재체pEGFP-C1휴대적EGFP융합;운용지질체적방법,장획득적중조질립전염도MA104세포중,재형광현미경하관찰단백적표체급기재세포중적분포정황.결과 성공구건료융합표체질립；전염세포후,융합단백가재MA104세포중표체차주요분포재포질중.결론 RV VP6가여EGFP융합표체,융합단백재세포질중정균균적분포,여RV감염세포중합성적VP6단백적분포유교대적차별.
