西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
2160-2163
,共4页
余功明%胡春锦%魏源文%史国英%岑贞陆%覃丽萍%黎起秦%黄思良
餘功明%鬍春錦%魏源文%史國英%岑貞陸%覃麗萍%黎起秦%黃思良
여공명%호춘금%위원문%사국영%잠정륙%담려평%려기진%황사량
水稻纹枯病菌%总蛋白%提取方法%双向电泳
水稻紋枯病菌%總蛋白%提取方法%雙嚮電泳
수도문고병균%총단백%제취방법%쌍향전영
为建立水稻纹枯病菌菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱.采用了酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法进行水稻纹枯病菌菌体蛋白质的提取,利用17cm、pH 5 ～8的IPG胶条对样品进行双向电泳,用PDQuest 8.0软件对电泳图谱进行分析,确定电泳的最佳参数.结果显示:采用17cm、pH 5 ～8的IPG胶条能得到较好的双向电泳图谱；同一样品的三种不同蛋白提取方法(酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法)分别得到1278、885、827个蛋白质点.酚抽提法能有效去除样品中的盐分和小分子的干扰,得到背景清晰的蛋白图谱；TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法所得图谱有一定的杂质干扰,同时TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法有蛋白点缺失,尤其在碱性端存在明显缺失现泉.研究结果建立了一套适于水稻纹枯病菌菌体蛋白的可靠提取方法和双向电泳体系,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础.
為建立水稻紋枯病菌菌體蛋白的雙嚮電泳技術,穫得分辨度高、重複性好的雙嚮電泳圖譜.採用瞭酚抽提法、TCA/丙酮沉澱法和丙酮沉澱法進行水稻紋枯病菌菌體蛋白質的提取,利用17cm、pH 5 ～8的IPG膠條對樣品進行雙嚮電泳,用PDQuest 8.0軟件對電泳圖譜進行分析,確定電泳的最佳參數.結果顯示:採用17cm、pH 5 ～8的IPG膠條能得到較好的雙嚮電泳圖譜；同一樣品的三種不同蛋白提取方法(酚抽提法、TCA/丙酮沉澱法和丙酮沉澱法)分彆得到1278、885、827箇蛋白質點.酚抽提法能有效去除樣品中的鹽分和小分子的榦擾,得到揹景清晰的蛋白圖譜；TCA/丙酮沉澱法和丙酮沉澱法所得圖譜有一定的雜質榦擾,同時TCA/丙酮沉澱法和丙酮沉澱法有蛋白點缺失,尤其在堿性耑存在明顯缺失現泉.研究結果建立瞭一套適于水稻紋枯病菌菌體蛋白的可靠提取方法和雙嚮電泳體繫,為進一步研究其蛋白質組學奠定瞭基礎.
위건립수도문고병균균체단백적쌍향전영기술,획득분변도고、중복성호적쌍향전영도보.채용료분추제법、TCA/병동침정법화병동침정법진행수도문고병균균체단백질적제취,이용17cm、pH 5 ～8적IPG효조대양품진행쌍향전영,용PDQuest 8.0연건대전영도보진행분석,학정전영적최가삼수.결과현시:채용17cm、pH 5 ～8적IPG효조능득도교호적쌍향전영도보；동일양품적삼충불동단백제취방법(분추제법、TCA/병동침정법화병동침정법)분별득도1278、885、827개단백질점.분추제법능유효거제양품중적염분화소분자적간우,득도배경청석적단백도보；TCA/병동침정법화병동침정법소득도보유일정적잡질간우,동시TCA/병동침정법화병동침정법유단백점결실,우기재감성단존재명현결실현천.연구결과건립료일투괄우수도문고병균균체단백적가고제취방법화쌍향전영체계,위진일보연구기단백질조학전정료기출.
