西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2012年
7期
20-24,90
,共6页
赵启法%张改平%职爱民%宋春美%张晓辉%王爱萍
趙啟法%張改平%職愛民%宋春美%張曉輝%王愛萍
조계법%장개평%직애민%송춘미%장효휘%왕애평
头孢氨苄%人工抗原%合成%多克隆抗体%制备
頭孢氨芐%人工抗原%閤成%多剋隆抗體%製備
두포안변%인공항원%합성%다극륭항체%제비
为合成头孢氨苄(Cefalexin,CEX)的人工抗原,制备特异性的CEX多克隆抗体.采用戊二醛法合成头孢氨苄全抗原CEX BSA、CEX-OVA,紫外分光光度计(ultraviolet spectrophotometry,UV)、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,用CEX-BSA免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定多抗血清效价,阻断ELISA鉴定其敏感性、特异性.结果显示,紫外扫描测得CEX BSA、CEX OVA中CEX和BSA、OVA的分子结合比分别为21.7∶1和14.6∶1;SDS-PAGE结果表明,BSA的泳动速度大于CEX -BSA,说明CEX-BSA的分子质量大于BSA,进一步说明CEX与BSA偶联成功；2号小鼠抗血清的效价最高,对CEX的IC500为769.588 μg/L、与头孢拉定的交叉反应率为1.283％,与其他药物无交叉反应.说明通过系列ELISA鉴定,获得高价、敏感、特异的多克隆抗体.
為閤成頭孢氨芐(Cefalexin,CEX)的人工抗原,製備特異性的CEX多剋隆抗體.採用戊二醛法閤成頭孢氨芐全抗原CEX BSA、CEX-OVA,紫外分光光度計(ultraviolet spectrophotometry,UV)、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鑒定,用CEX-BSA免疫BALB/c小鼠,間接ELISA測定多抗血清效價,阻斷ELISA鑒定其敏感性、特異性.結果顯示,紫外掃描測得CEX BSA、CEX OVA中CEX和BSA、OVA的分子結閤比分彆為21.7∶1和14.6∶1;SDS-PAGE結果錶明,BSA的泳動速度大于CEX -BSA,說明CEX-BSA的分子質量大于BSA,進一步說明CEX與BSA偶聯成功；2號小鼠抗血清的效價最高,對CEX的IC500為769.588 μg/L、與頭孢拉定的交扠反應率為1.283％,與其他藥物無交扠反應.說明通過繫列ELISA鑒定,穫得高價、敏感、特異的多剋隆抗體.
위합성두포안변(Cefalexin,CEX)적인공항원,제비특이성적CEX다극륭항체.채용무이철법합성두포안변전항원CEX BSA、CEX-OVA,자외분광광도계(ultraviolet spectrophotometry,UV)、SDS취병희선알응효전영(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)감정,용CEX-BSA면역BALB/c소서,간접ELISA측정다항혈청효개,조단ELISA감정기민감성、특이성.결과현시,자외소묘측득CEX BSA、CEX OVA중CEX화BSA、OVA적분자결합비분별위21.7∶1화14.6∶1;SDS-PAGE결과표명,BSA적영동속도대우CEX -BSA,설명CEX-BSA적분자질량대우BSA,진일보설명CEX여BSA우련성공；2호소서항혈청적효개최고,대CEX적IC500위769.588 μg/L、여두포랍정적교차반응솔위1.283％,여기타약물무교차반응.설명통과계렬ELISA감정,획득고개、민감、특이적다극륭항체.
