安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2002年
1期
22-25
,共4页
郭丽%王健伟%史百芬%黄升海%赵玉琪%洪涛
郭麗%王健偉%史百芬%黃升海%趙玉琪%洪濤
곽려%왕건위%사백분%황승해%조옥기%홍도
基因,vpr%甲胎蛋白类%基因表达%遗传载体
基因,vpr%甲胎蛋白類%基因錶達%遺傳載體
기인,vpr%갑태단백류%기인표체%유전재체
目的构建可在肝癌细胞中特异性表达人HIV-1 vpr基因的重组表达载体.方法用PCR的方法从pBSXCYPYVPR-xcTHY(简称vpr质粒)中扩增HIV-1 vpr基因片段,克隆到pGEM-T载体中,构建克隆载体pGEM-T/vpr,切下vpr片段后插入到pCI质粒中polyA的上游,构建中间载体pCI/vpr,再切下vprA(vpr+polyA)插入到pAF5.1中AFP 启动子的下游,从而把AFP 启动子和polyA尾分别克隆到vpr基因的上游和下游,构建成pAFVPRA载体.结果成功构建了带有AFP 启动子和polyA尾的载体 pAFVPRA.结论 pAFVPRA质粒构建成功后,可进一步通过合适的方式把HIV-1 vpr基因导入肝细胞,以探讨vpr基因对原发性肝癌细胞的杀伤作用.
目的構建可在肝癌細胞中特異性錶達人HIV-1 vpr基因的重組錶達載體.方法用PCR的方法從pBSXCYPYVPR-xcTHY(簡稱vpr質粒)中擴增HIV-1 vpr基因片段,剋隆到pGEM-T載體中,構建剋隆載體pGEM-T/vpr,切下vpr片段後插入到pCI質粒中polyA的上遊,構建中間載體pCI/vpr,再切下vprA(vpr+polyA)插入到pAF5.1中AFP 啟動子的下遊,從而把AFP 啟動子和polyA尾分彆剋隆到vpr基因的上遊和下遊,構建成pAFVPRA載體.結果成功構建瞭帶有AFP 啟動子和polyA尾的載體 pAFVPRA.結論 pAFVPRA質粒構建成功後,可進一步通過閤適的方式把HIV-1 vpr基因導入肝細胞,以探討vpr基因對原髮性肝癌細胞的殺傷作用.
목적구건가재간암세포중특이성표체인HIV-1 vpr기인적중조표체재체.방법용PCR적방법종pBSXCYPYVPR-xcTHY(간칭vpr질립)중확증HIV-1 vpr기인편단,극륭도pGEM-T재체중,구건극륭재체pGEM-T/vpr,절하vpr편단후삽입도pCI질립중polyA적상유,구건중간재체pCI/vpr,재절하vprA(vpr+polyA)삽입도pAF5.1중AFP 계동자적하유,종이파AFP 계동자화polyA미분별극륭도vpr기인적상유화하유,구건성pAFVPRA재체.결과성공구건료대유AFP 계동자화polyA미적재체 pAFVPRA.결론 pAFVPRA질립구건성공후,가진일보통과합괄적방식파HIV-1 vpr기인도입간세포,이탐토vpr기인대원발성간암세포적살상작용.
