上海免疫学杂志
上海免疫學雜誌
상해면역학잡지
SHANGHAI JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
5期
293-297
,共5页
林瑛%陈婉蓉%季永镛%孙兵
林瑛%陳婉蓉%季永鏞%孫兵
림영%진완용%계영용%손병
IL-12Rβ2%基因克隆%蛋白表达%多克隆抗体
IL-12Rβ2%基因剋隆%蛋白錶達%多剋隆抗體
IL-12Rβ2%기인극륭%단백표체%다극륭항체
从ConA刺激的小鼠脾细胞中抽提总RNA,用RT-PCR的方法克隆出小鼠IL-12Rβ2亚基胞内区基因.再将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,转化宿主菌BL-21(DE3),用IPTG诱导宿主菌表达蛋白.SDS-PAGE分析结果表明,蛋白主要存在于包涵体中.利用割胶回收的方法纯化目的蛋白,免疫兔子制备多抗.经ELISA检测,证明免疫后兔血清中有高滴度的针对IL-12Rβ2亚基胞内区的抗体.
從ConA刺激的小鼠脾細胞中抽提總RNA,用RT-PCR的方法剋隆齣小鼠IL-12Rβ2亞基胞內區基因.再將其插入到原覈錶達載體pGEX-4T-1中,轉化宿主菌BL-21(DE3),用IPTG誘導宿主菌錶達蛋白.SDS-PAGE分析結果錶明,蛋白主要存在于包涵體中.利用割膠迴收的方法純化目的蛋白,免疫兔子製備多抗.經ELISA檢測,證明免疫後兔血清中有高滴度的針對IL-12Rβ2亞基胞內區的抗體.
종ConA자격적소서비세포중추제총RNA,용RT-PCR적방법극륭출소서IL-12Rβ2아기포내구기인.재장기삽입도원핵표체재체pGEX-4T-1중,전화숙주균BL-21(DE3),용IPTG유도숙주균표체단백.SDS-PAGE분석결과표명,단백주요존재우포함체중.이용할효회수적방법순화목적단백,면역토자제비다항.경ELISA검측,증명면역후토혈청중유고적도적침대IL-12Rβ2아기포내구적항체.
