CAJ | 학술논문

观察了骨髓间充质干细胞(MSC)在视网膜下移植后的定位以及分化后的蛋白表达情况.将体外培养的雄性大鼠MSC移植于成年大鼠视网膜下,4周后取眼球做石蜡切片并用Y染色体鉴定;将MSC用重组腺相关病毒AAV-gfp感染后移植,4周后在荧光显微镜下观察眼球冰冻切片中绿色荧光蛋白(GFP)的表达;并用4',6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记的MSC进行视网膜下移植,分别于10,20,35和50 d后观察DAPI荧光分布,并在阳性的连续切片上做神经元核(Ne-uN),神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和角蛋白(CK)免疫组化染色.结果显示,光学显微镜下Y染色体原位杂交观察,荧光显微镜下GFP观察及DAPI观察均发现来源于MSC的阳性细胞融入了原来的视网膜结构,这些细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,细胞形态结构与周围视网膜相似;DAPI标记观察表明,移植后至50 d无细胞增生,50 d后阳性细胞数量和分布范围缩小.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞NeuN,NSE,GFAP和CK的表达与周围组织相同.3种标记方法检测到的视网膜结构完整,但某些区域的细胞排列不整齐.上述结果表明,MSC在视网膜下移植后可与原视网膜结构相融合,MSC具有分化为类视网膜结构的能力.
관찰료골수간충질간세포(MSC)재시망막하이식후적정위이급분화후적단백표체정황.장체외배양적웅성대서MSC이식우성년대서시망막하,4주후취안구주석사절편병용Y염색체감정;장MSC용중조선상관병독AAV-gfp감염후이식,4주후재형광현미경하관찰안구빙동절편중록색형광단백(GFP)적표체;병용4',6-이미-2-분기신타(DAPI)표기적MSC진행시망막하이식,분별우10,20,35화50 d후관찰DAPI형광분포,병재양성적련속절편상주신경원핵(Ne-uN),신경원특이성희순화매(NSE),효질섬유산성단백(GFAP)화각단백(CK)면역조화염색.결과현시,광학현미경하Y염색체원위잡교관찰,형광현미경하GFP관찰급DAPI관찰균발현래원우MSC적양성세포융입료원래적시망막결구,저사세포분포우시망막색소상피층、시세포층、쌍겁세포층급절세포층,세포형태결구여주위시망막상사;DAPI표기관찰표명,이식후지50 d무세포증생,50 d후양성세포수량화분포범위축소.면역조직화학염색발현양성구역적세포NeuN,NSE,GFAP화CK적표체여주위조직상동.3충표기방법검측도적시망막결구완정,단모사구역적세포배렬불정제.상술결과표명,MSC재시망막하이식후가여원시망막결구상융합,MSC구유분화위류시망막결구적능력.