中国应用生理学杂志
中國應用生理學雜誌
중국응용생이학잡지
2005年
4期
371-375,彩插Ⅰ
,共6页
汪国忠%胡申江%郑哲岚%孙坚%李江%郑霞%朱朝晖%姚宇玫
汪國忠%鬍申江%鄭哲嵐%孫堅%李江%鄭霞%硃朝暉%姚宇玫
왕국충%호신강%정철람%손견%리강%정하%주조휘%요우매
超声%造影剂%基因%心肌细胞
超聲%造影劑%基因%心肌細胞
초성%조영제%기인%심기세포
目的:通过超声破裂载基因微泡介导报告基因心肌细胞转染,探讨其能否增强心肌细胞外源基因转染与表达.方法:以β-galactosidase质粒为报告基因,将其与自制氟碳气体微泡粘附,制备载基因微泡.利用诊断性超声破裂微泡进行体外心肌细胞基因转染;以磷酸钙共沉淀转染为阳性对照并将其以不同方式与超声破裂微泡技术联合应用,以期进一步增强基因转染效果.分别采用原位染色及酶学定量检测β-galactosidase表达水平,同时进行细胞活性检测.结果:超声破裂载基因氟碳气体微泡(PESDA)转染组心肌细胞β-galactosidase表达水平可达单纯质粒转染组60倍(P＜0.01).磷酸钙共沉淀转染3.67倍(P＜0.01)超声强度、微泡浓度对超声破裂介导基因转染效果有明显影响.超声破裂微泡技术与磷酸钙共沉淀联合应用可进一步提高报告基因的表达(P＜0.05),即使在磷酸钙转染后6 h,超声破裂微泡仍能明显增强报告的基因的表达(P＜0 05).结论:超声破裂微泡技术是一种高效基因转染方法,其不但能增加DNA转染,而且增强入胞后基因的表达.超声破裂微泡与其它基因转染技术联合应用能进一步增加基因转染效率.
目的:通過超聲破裂載基因微泡介導報告基因心肌細胞轉染,探討其能否增彊心肌細胞外源基因轉染與錶達.方法:以β-galactosidase質粒為報告基因,將其與自製氟碳氣體微泡粘附,製備載基因微泡.利用診斷性超聲破裂微泡進行體外心肌細胞基因轉染;以燐痠鈣共沉澱轉染為暘性對照併將其以不同方式與超聲破裂微泡技術聯閤應用,以期進一步增彊基因轉染效果.分彆採用原位染色及酶學定量檢測β-galactosidase錶達水平,同時進行細胞活性檢測.結果:超聲破裂載基因氟碳氣體微泡(PESDA)轉染組心肌細胞β-galactosidase錶達水平可達單純質粒轉染組60倍(P＜0.01).燐痠鈣共沉澱轉染3.67倍(P＜0.01)超聲彊度、微泡濃度對超聲破裂介導基因轉染效果有明顯影響.超聲破裂微泡技術與燐痠鈣共沉澱聯閤應用可進一步提高報告基因的錶達(P＜0.05),即使在燐痠鈣轉染後6 h,超聲破裂微泡仍能明顯增彊報告的基因的錶達(P＜0 05).結論:超聲破裂微泡技術是一種高效基因轉染方法,其不但能增加DNA轉染,而且增彊入胞後基因的錶達.超聲破裂微泡與其它基因轉染技術聯閤應用能進一步增加基因轉染效率.
목적:통과초성파렬재기인미포개도보고기인심기세포전염,탐토기능부증강심기세포외원기인전염여표체.방법:이β-galactosidase질립위보고기인,장기여자제불탄기체미포점부,제비재기인미포.이용진단성초성파렬미포진행체외심기세포기인전염;이린산개공침정전염위양성대조병장기이불동방식여초성파렬미포기술연합응용,이기진일보증강기인전염효과.분별채용원위염색급매학정량검측β-galactosidase표체수평,동시진행세포활성검측.결과:초성파렬재기인불탄기체미포(PESDA)전염조심기세포β-galactosidase표체수평가체단순질립전염조60배(P＜0.01).린산개공침정전염3.67배(P＜0.01)초성강도、미포농도대초성파렬개도기인전염효과유명현영향.초성파렬미포기술여린산개공침정연합응용가진일보제고보고기인적표체(P＜0.05),즉사재린산개전염후6 h,초성파렬미포잉능명현증강보고적기인적표체(P＜0 05).결론:초성파렬미포기술시일충고효기인전염방법,기불단능증가DNA전염,이차증강입포후기인적표체.초성파렬미포여기타기인전염기술연합응용능진일보증가기인전염효솔.
