武警医学院学报
武警醫學院學報
무경의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE CPAPF
2009年
1期
20-23,27,封3
,共6页
姚丽%谢红%靳秋月%呼文亮%陈立军
姚麗%謝紅%靳鞦月%呼文亮%陳立軍
요려%사홍%근추월%호문량%진립군
基因芯片%二氢青蒿素%细胞周期%细胞凋亡%K562细胞
基因芯片%二氫青蒿素%細胞週期%細胞凋亡%K562細胞
기인심편%이경청호소%세포주기%세포조망%K562세포
[目的]利用基因芯片检测二氢青蒿素作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平探讨二氢青蒿素抑制K562细胞增殖的作用机制.[方法]K562细胞经不同浓度二氢青蒿素处理24 h,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化.提取总RNA,逆转录生成cDNA,同时Cy3标记.标记好的cDNA与基因芯片杂交,用扫描仪检测杂交结果.[结果]倒置光显微镜可见细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多.荧光显微镜下可观察到染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块,即凋亡小体,同时有死亡细胞.流式细胞仪检测显示G2期细胞的比例明显增加.扫描杂交结果数据显示其中13条基因表达有差异.表达上调的基因有chk1,表达下调的基因有:PCNA、cyelinB1、cyclinD1、cyelinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA-PK、DNA-TopoI、mcl-1、jnk、VEGF.[结论]二氢青蒿素可以抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡等有关.
[目的]利用基因芯片檢測二氫青蒿素作用于K562細胞後的基因錶達情況,從基因水平探討二氫青蒿素抑製K562細胞增殖的作用機製.[方法]K562細胞經不同濃度二氫青蒿素處理24 h,倒置光顯微鏡和熒光顯微鏡觀察細胞形態學變化,流式細胞儀檢測細胞週期變化.提取總RNA,逆轉錄生成cDNA,同時Cy3標記.標記好的cDNA與基因芯片雜交,用掃描儀檢測雜交結果.[結果]倒置光顯微鏡可見細胞齣現不同程度的皺縮,覈分裂相減少,細胞密度下降,漂浮細胞增多.熒光顯微鏡下可觀察到染色質高度濃縮、邊緣化,凝聚成明亮的糰塊,即凋亡小體,同時有死亡細胞.流式細胞儀檢測顯示G2期細胞的比例明顯增加.掃描雜交結果數據顯示其中13條基因錶達有差異.錶達上調的基因有chk1,錶達下調的基因有:PCNA、cyelinB1、cyclinD1、cyelinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA-PK、DNA-TopoI、mcl-1、jnk、VEGF.[結論]二氫青蒿素可以抑製K562細胞增殖,作用機製與改變細胞週期某些調控物質的基因錶達、誘導K562細胞凋亡等有關.
[목적]이용기인심편검측이경청호소작용우K562세포후적기인표체정황,종기인수평탐토이경청호소억제K562세포증식적작용궤제.[방법]K562세포경불동농도이경청호소처리24 h,도치광현미경화형광현미경관찰세포형태학변화,류식세포의검측세포주기변화.제취총RNA,역전록생성cDNA,동시Cy3표기.표기호적cDNA여기인심편잡교,용소묘의검측잡교결과.[결과]도치광현미경가견세포출현불동정도적추축,핵분렬상감소,세포밀도하강,표부세포증다.형광현미경하가관찰도염색질고도농축、변연화,응취성명량적단괴,즉조망소체,동시유사망세포.류식세포의검측현시G2기세포적비례명현증가.소묘잡교결과수거현시기중13조기인표체유차이.표체상조적기인유chk1,표체하조적기인유:PCNA、cyelinB1、cyclinD1、cyelinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA-PK、DNA-TopoI、mcl-1、jnk、VEGF.[결론]이경청호소가이억제K562세포증식,작용궤제여개변세포주기모사조공물질적기인표체、유도K562세포조망등유관.