中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
8期
128-130
,共3页
丁鹏%李俊%于周%程凯慧%吴家强%王金宝
丁鵬%李俊%于週%程凱慧%吳傢彊%王金寶
정붕%리준%우주%정개혜%오가강%왕금보
猪圆环病毒2型%ORF3基因%转录分析
豬圓環病毒2型%ORF3基因%轉錄分析
저원배병독2형%ORF3기인%전록분석
对PCV2 SD2株(DQ478947)进行了序列分析发现,其含有11个开放阅读框,与以往分离株开放阅读框有较大差异.根据GenBank发表的PCV2序列设计特异性引物,扩增ORF3基因,预计扩增片段大小为209 bp.分别在接毒后12、24、36、48 h,用Trizol法自病毒细胞裂解液提取总RNA,然后用DNase I处理,除去残留的病毒DNA,利用醋酸纤维素分离mR-NA,用上述引物进行RT-PCR扩增.在接毒24 h后扩增出的目的片段大小与预计扩增片段大小相符合,测序结果表明扩增片段与PCV2 SD2(DQ478947)ORF3基因序列相符.由此证实,PCV2山东分离株ORF3基因可在接毒24 h后于转录水平表达,为ORF3基因的深入研究打下了基础.
對PCV2 SD2株(DQ478947)進行瞭序列分析髮現,其含有11箇開放閱讀框,與以往分離株開放閱讀框有較大差異.根據GenBank髮錶的PCV2序列設計特異性引物,擴增ORF3基因,預計擴增片段大小為209 bp.分彆在接毒後12、24、36、48 h,用Trizol法自病毒細胞裂解液提取總RNA,然後用DNase I處理,除去殘留的病毒DNA,利用醋痠纖維素分離mR-NA,用上述引物進行RT-PCR擴增.在接毒24 h後擴增齣的目的片段大小與預計擴增片段大小相符閤,測序結果錶明擴增片段與PCV2 SD2(DQ478947)ORF3基因序列相符.由此證實,PCV2山東分離株ORF3基因可在接毒24 h後于轉錄水平錶達,為ORF3基因的深入研究打下瞭基礎.
대PCV2 SD2주(DQ478947)진행료서렬분석발현,기함유11개개방열독광,여이왕분리주개방열독광유교대차이.근거GenBank발표적PCV2서렬설계특이성인물,확증ORF3기인,예계확증편단대소위209 bp.분별재접독후12、24、36、48 h,용Trizol법자병독세포렬해액제취총RNA,연후용DNase I처리,제거잔류적병독DNA,이용작산섬유소분리mR-NA,용상술인물진행RT-PCR확증.재접독24 h후확증출적목적편단대소여예계확증편단대소상부합,측서결과표명확증편단여PCV2 SD2(DQ478947)ORF3기인서렬상부.유차증실,PCV2산동분리주ORF3기인가재접독24 h후우전록수평표체,위ORF3기인적심입연구타하료기출.
