西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
6期
786-789
,共4页
何娟娟%马列婷%王亚文%惠凌云%杨广笑%王全颖
何娟娟%馬列婷%王亞文%惠凌雲%楊廣笑%王全穎
하연연%마렬정%왕아문%혜릉운%양엄소%왕전영
NT4-AcSDKP%PCR技术%重组腺相关病毒
NT4-AcSDKP%PCR技術%重組腺相關病毒
NT4-AcSDKP%PCR기술%중조선상관병독
目的 构建携带NT4-AcSDKP融合基因的重组腺相关病毒,为探讨AcSDKP(乙酰化-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸)的多样化功能提供基础.方法 以质粒载体pGEM-T Easy/NT4为模板,PCR技术获得NT4-AcSDKP基因片段,插入腺相关病毒载体穿梭质粒pSSHG-CMV,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP.用腺病毒全基因组质粒pFG140、辅助质粒pAAV/Ad和已构建的重组质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80％融合的293细胞,包装rAAV-NT4-AcSDKP,RT-PCR方法测定重组腺相关病毒滴度.结果 成功合成NT4-AcSDKP基因,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP,包装获得滴度为3.40×1010 copies/mL的重组腺相关病毒.结论 成功获得表达AcSDKP重组腺相关病毒,为抗炎、抗纤维化、器官修复等方面的进一步研究奠定了基础.
目的 構建攜帶NT4-AcSDKP融閤基因的重組腺相關病毒,為探討AcSDKP(乙酰化-絲氨酰-天鼕氨酰-賴氨酰-脯氨痠)的多樣化功能提供基礎.方法 以質粒載體pGEM-T Easy/NT4為模闆,PCR技術穫得NT4-AcSDKP基因片段,插入腺相關病毒載體穿梭質粒pSSHG-CMV,構建重組質粒pSSCMV-NT4-AcSDKP.用腺病毒全基因組質粒pFG140、輔助質粒pAAV/Ad和已構建的重組質粒,三質粒燐痠鈣共沉澱法轉染80％融閤的293細胞,包裝rAAV-NT4-AcSDKP,RT-PCR方法測定重組腺相關病毒滴度.結果 成功閤成NT4-AcSDKP基因,構建重組質粒pSSCMV-NT4-AcSDKP,包裝穫得滴度為3.40×1010 copies/mL的重組腺相關病毒.結論 成功穫得錶達AcSDKP重組腺相關病毒,為抗炎、抗纖維化、器官脩複等方麵的進一步研究奠定瞭基礎.
목적 구건휴대NT4-AcSDKP융합기인적중조선상관병독,위탐토AcSDKP(을선화-사안선-천동안선-뢰안선-포안산)적다양화공능제공기출.방법 이질립재체pGEM-T Easy/NT4위모판,PCR기술획득NT4-AcSDKP기인편단,삽입선상관병독재체천사질립pSSHG-CMV,구건중조질립pSSCMV-NT4-AcSDKP.용선병독전기인조질립pFG140、보조질립pAAV/Ad화이구건적중조질립,삼질립린산개공침정법전염80％융합적293세포,포장rAAV-NT4-AcSDKP,RT-PCR방법측정중조선상관병독적도.결과 성공합성NT4-AcSDKP기인,구건중조질립pSSCMV-NT4-AcSDKP,포장획득적도위3.40×1010 copies/mL적중조선상관병독.결론 성공획득표체AcSDKP중조선상관병독,위항염、항섬유화、기관수복등방면적진일보연구전정료기출.
