CAJ | 학술논문

目的:探讨人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)在大肠杆菌中高效表达的方法及重组人aFGF的生物学活性.方法:①通过PCR法扩增人aFGF引入点突变,对其密码子进行改造;②构建aFGF-pET-28a重组质粒并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达;③重组蛋白的纯化及生物学活性研究.结果:通过PCR扩增,将设计的核酸水平突变引入到aFGF DNA中,使其自起始密码ATG后的前50个碱基均为原核细胞偏爱密码子、并保持原氨基酸序列不变,成功地实现了重组人aFGF在大肠杆菌中的高效表达,并通过降低培养温度使大肠杆菌中可溶性目的蛋白的含量大幅增加,原核表达的aFGF亦具有天然生物学活性,结论:通过对aFGF DNA碱基进行改造,可大幅度提高aFGF在大肠杆菌中的表达量,且目的蛋白具有良好的生物学活性.
목적:탐토인산성성섬유세포생장인자(acidic fibroblast growth factor,aFGF)재대장간균중고효표체적방법급중조인aFGF적생물학활성.방법:①통과PCR법확증인aFGF인입점돌변,대기밀마자진행개조;②구건aFGF-pET-28a중조질립병재대장간균BL21(DE3)중표체;③중조단백적순화급생물학활성연구.결과:통과PCR확증,장설계적핵산수평돌변인입도aFGF DNA중,사기자기시밀마ATG후적전50개감기균위원핵세포편애밀마자、병보지원안기산서렬불변,성공지실현료중조인aFGF재대장간균중적고효표체,병통과강저배양온도사대장간균중가용성목적단백적함량대폭증가,원핵표체적aFGF역구유천연생물학활성,결론:통과대aFGF DNA감기진행개조,가대폭도제고aFGF재대장간균중적표체량,차목적단백구유량호적생물학활성.