畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
7期
657-662
,共6页
李碧春%周冠月%陈国宏%孙国波%孙鹏翔%徐琪%刘铁铮
李碧春%週冠月%陳國宏%孫國波%孫鵬翔%徐琪%劉鐵錚
리벽춘%주관월%진국굉%손국파%손붕상%서기%류철쟁
鸡%精原干细胞%冷冻保存
鷄%精原榦細胞%冷凍保存
계%정원간세포%냉동보존
采用二酶3步法获取孵化第19 d的鸡胚精原干细胞(SSCs),比较在快速冷冻条件下3种冷冻保护剂(DMSO、乙二醇、甘油)在3个浓度5%、10%、15%条件下对鸡胚精原干细胞的冷冻保存效果进行研究.结果显示:(1)当DMSO的浓度为5%、10%及15%时,复苏后细胞存活率分别为73.1%、88.6%和74.8%,三者差异显著(P＜0.05);而10%DMSO保存精原干细胞的存活率、复苏后培养细胞生长和集落形成均显著高于其它2个浓度;当乙二醇浓度为5%、10%和15%时,复苏后细胞存活率分别为69.4%、83.1%和65.2%,三者差异显著(P＜0.05);复苏后无论饲养层存在与否,SSCs均能增殖,但未有AKP阳性集落生成;当甘油浓度为5%、10%、15%时,复苏后细胞存活率均小于15%,三者差异不显著(P＞0.05);复苏后细胞存活时间极短,仅存活12 h左右;(2)当在10%DMSO浓度条件,复苏后SSCs在有饲养细胞层的条件下,培养5 d形成集落,表明10%DMSO是鸡胚精原于细胞适宜的冷冻保护剂.
採用二酶3步法穫取孵化第19 d的鷄胚精原榦細胞(SSCs),比較在快速冷凍條件下3種冷凍保護劑(DMSO、乙二醇、甘油)在3箇濃度5%、10%、15%條件下對鷄胚精原榦細胞的冷凍保存效果進行研究.結果顯示:(1)噹DMSO的濃度為5%、10%及15%時,複囌後細胞存活率分彆為73.1%、88.6%和74.8%,三者差異顯著(P＜0.05);而10%DMSO保存精原榦細胞的存活率、複囌後培養細胞生長和集落形成均顯著高于其它2箇濃度;噹乙二醇濃度為5%、10%和15%時,複囌後細胞存活率分彆為69.4%、83.1%和65.2%,三者差異顯著(P＜0.05);複囌後無論飼養層存在與否,SSCs均能增殖,但未有AKP暘性集落生成;噹甘油濃度為5%、10%、15%時,複囌後細胞存活率均小于15%,三者差異不顯著(P＞0.05);複囌後細胞存活時間極短,僅存活12 h左右;(2)噹在10%DMSO濃度條件,複囌後SSCs在有飼養細胞層的條件下,培養5 d形成集落,錶明10%DMSO是鷄胚精原于細胞適宜的冷凍保護劑.
채용이매3보법획취부화제19 d적계배정원간세포(SSCs),비교재쾌속냉동조건하3충냉동보호제(DMSO、을이순、감유)재3개농도5%、10%、15%조건하대계배정원간세포적냉동보존효과진행연구.결과현시:(1)당DMSO적농도위5%、10%급15%시,복소후세포존활솔분별위73.1%、88.6%화74.8%,삼자차이현저(P＜0.05);이10%DMSO보존정원간세포적존활솔、복소후배양세포생장화집락형성균현저고우기타2개농도;당을이순농도위5%、10%화15%시,복소후세포존활솔분별위69.4%、83.1%화65.2%,삼자차이현저(P＜0.05);복소후무론사양층존재여부,SSCs균능증식,단미유AKP양성집락생성;당감유농도위5%、10%、15%시,복소후세포존활솔균소우15%,삼자차이불현저(P＞0.05);복소후세포존활시간겁단,부존활12 h좌우;(2)당재10%DMSO농도조건,복소후SSCs재유사양세포층적조건하,배양5 d형성집락,표명10%DMSO시계배정원우세포괄의적냉동보호제.
