CAJ | 학술논문

目的:观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用.方法:利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列(R9)与AIF C-末端结构域编码区重组, 然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组, 构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体.用脂质体法转染CHO细胞, 经G418筛选, 建立稳定转染的细胞株, 通过RT-PCR、Western blot、流式细胞术(FCM)等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性.结果:经过酶切鉴定与测序证实, 带有ImmunoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功, 经RT-PCR、Western blot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达, 用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性, 而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响.结论:ImmunoAIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞.
목적:관찰면역촉조망분자ImmunoAIF△1-480대HER2양성종류세포적살상작용.방법:이용PCR적방법장구취정안산편마서렬(R9)여AIF C-말단결구역편마구중조, 연후장R9-AIF△1-480기인여pCMV-e23sFv재체중조, 구건면역촉조망분자ImmunoAIF△1-480진핵표체재체.용지질체법전염CHO세포, 경G418사선, 건립은정전염적세포주, 통과RT-PCR、Western blot、류식세포술(FCM)등방법검측중조기인재전염세포중적표체급기대HER2양성종류세포적특이성살상활성.결과:경과매절감정여측서증실, 대유ImmunoAIF△1-480기인적진핵표체재체구건성공, 경RT-PCR、Western blot가검측도배양상청중면역촉조망기인적표체, 용FCM검측발현융합단백ImmunoAIF△1-480대HER2양성종류세포SGC-7901화SKBR-3유명현적촉조망활성, 이대불표체HER2분자적ECV-304세포궤호몰유영향.결론:ImmunoAIF△1-480가이특이성살상HER2양성종류세포.