医学综述
醫學綜述
의학종술
MEDICAL RECAPITULATE
2009年
22期
3498-3501
,共4页
王彪%单秀英%林菊丽%庄福连%鲁开化
王彪%單秀英%林菊麗%莊福連%魯開化
왕표%단수영%림국려%장복련%로개화
RNA干扰%促血管生成素2%受体Tie2%重组质粒%载体
RNA榦擾%促血管生成素2%受體Tie2%重組質粒%載體
RNA간우%촉혈관생성소2%수체Tie2%중조질립%재체
目的 构建促血管生成素2(Ang-2)及其受体Tie2基因的RNA干扰(RNAi)表达载体.方法 以Ang-2、Tje2的mRNA已知序列为靶点,化学合成能编码针对Ang-2、Tje2基因的短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸各2对,退火处理后克隆到pSilencer1.0-U6-siRNA表达载体的U6RNA聚合酶Ⅲ启动子的下游,构建重组质粒pSliencer-1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA.结果 将与目的 片段相符的双链shRNA和线性化的pSilencer 1.0-U6-siRNA质粒连接后,经限制性内切酶HindⅢ酶切电泳及测序分析证实,2条重组质粒载体构建正确,无任何碱基突变.结论 成功构建pSilencer 1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA重组质粒各2条,为进一步研究其对血管生成的作用打下基础.
目的 構建促血管生成素2(Ang-2)及其受體Tie2基因的RNA榦擾(RNAi)錶達載體.方法 以Ang-2、Tje2的mRNA已知序列為靶點,化學閤成能編碼針對Ang-2、Tje2基因的短髮夾RNA(shRNA)序列的寡覈苷痠各2對,退火處理後剋隆到pSilencer1.0-U6-siRNA錶達載體的U6RNA聚閤酶Ⅲ啟動子的下遊,構建重組質粒pSliencer-1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA.結果 將與目的 片段相符的雙鏈shRNA和線性化的pSilencer 1.0-U6-siRNA質粒連接後,經限製性內切酶HindⅢ酶切電泳及測序分析證實,2條重組質粒載體構建正確,無任何堿基突變.結論 成功構建pSilencer 1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA重組質粒各2條,為進一步研究其對血管生成的作用打下基礎.
목적 구건촉혈관생성소2(Ang-2)급기수체Tie2기인적RNA간우(RNAi)표체재체.방법 이Ang-2、Tje2적mRNA이지서렬위파점,화학합성능편마침대Ang-2、Tje2기인적단발협RNA(shRNA)서렬적과핵감산각2대,퇴화처리후극륭도pSilencer1.0-U6-siRNA표체재체적U6RNA취합매Ⅲ계동자적하유,구건중조질립pSliencer-1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA.결과 장여목적 편단상부적쌍련shRNA화선성화적pSilencer 1.0-U6-siRNA질립련접후,경한제성내절매HindⅢ매절전영급측서분석증실,2조중조질립재체구건정학,무임하감기돌변.결론 성공구건pSilencer 1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA중조질립각2조,위진일보연구기대혈관생성적작용타하기출.
