生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
12期
196-200
,共5页
黄艳燕%黄靖华%卢福芝%孙靓%彭立新%周兴%黄日波
黃豔燕%黃靖華%盧福芝%孫靚%彭立新%週興%黃日波
황염연%황정화%로복지%손정%팽립신%주흥%황일파
D-(+)-乳酸脱氢酶%克隆%表达%鼠李糖乳杆菌
D-(+)-乳痠脫氫酶%剋隆%錶達%鼠李糖乳桿菌
D-(+)-유산탈경매%극륭%표체%서리당유간균
利用PCR的方法从鼠李糖乳杆茵基因组DNA中扩增到D-(+)-乳酸脱氢酶基因(ldhD),并连接到栽体pSE380上,构建表达质粒pSE-ldhD,将重组质粒pSE-ldhD转化大肠杆菌BL21(DE3),重组茵株经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明ldhD在大肠杆菌中实现了表达,表达产物的分子量约为37 kD.同时采用紫外分光光度法测定D-乳酸脱氢酶的酶活,测得重组菌株的D-乳酸脱氢酶活力为5.4 U/mL,最适反应温度为35℃,最适pH为5.6.
利用PCR的方法從鼠李糖乳桿茵基因組DNA中擴增到D-(+)-乳痠脫氫酶基因(ldhD),併連接到栽體pSE380上,構建錶達質粒pSE-ldhD,將重組質粒pSE-ldhD轉化大腸桿菌BL21(DE3),重組茵株經IPTG誘導錶達,SDS-PAGE電泳分析錶明ldhD在大腸桿菌中實現瞭錶達,錶達產物的分子量約為37 kD.同時採用紫外分光光度法測定D-乳痠脫氫酶的酶活,測得重組菌株的D-乳痠脫氫酶活力為5.4 U/mL,最適反應溫度為35℃,最適pH為5.6.
이용PCR적방법종서리당유간인기인조DNA중확증도D-(+)-유산탈경매기인(ldhD),병련접도재체pSE380상,구건표체질립pSE-ldhD,장중조질립pSE-ldhD전화대장간균BL21(DE3),중조인주경IPTG유도표체,SDS-PAGE전영분석표명ldhD재대장간균중실현료표체,표체산물적분자량약위37 kD.동시채용자외분광광도법측정D-유산탈경매적매활,측득중조균주적D-유산탈경매활력위5.4 U/mL,최괄반응온도위35℃,최괄pH위5.6.
